1、莪術(shù)為姜科植物蓬莪術(shù),廣西莪術(shù)和溫郁金的干燥根莖,具有順血調(diào)氣,消腫止痛的功能,而吉馬酮?jiǎng)t為莪術(shù)揮發(fā)油中主要的活性成分。經(jīng)研究報(bào)道,莪術(shù)揮發(fā)油具有良好的抗腫瘤、抗炎、抗病毒作用,并且有研究表明吉馬酮具有顯著抑癌效果,但尚未對(duì)其抗癌作用機(jī)制展開(kāi)深入研究。本文以肝癌HepG2細(xì)胞作為研究材料,通過(guò)Westernblotting,RT-PCR,以及流式細(xì)胞檢測(cè)等方法研究吉馬酮對(duì)HepG2細(xì)胞的增殖影響,主要研究結(jié)果有以下幾個(gè)方面:
　　

2、(1)吉馬酮?jiǎng)┝亢蜁r(shí)間依賴性地抑制肝癌HepG2細(xì)胞增殖。通過(guò)MTT比色法進(jìn)行測(cè)定,其結(jié)果表明吉馬酮能夠顯著抑制HepG2細(xì)胞的增殖,并且藥物濃度越高,時(shí)間作用越長(zhǎng),其抑制效果越明顯。當(dāng)濃度高于160μM時(shí),其細(xì)胞抑制效果無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。藥物處理48小時(shí)與處理24小時(shí)相比,沒(méi)有呈現(xiàn)時(shí)間依賴性。
　　(2)吉馬酮對(duì)HepG2細(xì)胞處理后呈現(xiàn)G2/M期周期阻滯。不同濃度吉馬酮處理肝癌HepG2細(xì)胞后,進(jìn)行PI單染,通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)

3、胞周期后呈現(xiàn)G2/M期阻滯。運(yùn)用RT-PCR和WesternBlotting技術(shù)檢測(cè)G2/M期關(guān)鍵基因CyclinB1和CDK1的表達(dá)情況,其結(jié)果表明吉馬酮能夠顯著抑制CyclinB1和CDK1在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上的表達(dá)。隨著吉馬酮濃度的提高,CyclinB1和CDK1的表達(dá)量下降,而且細(xì)胞周期阻滯在G2期,說(shuō)明吉馬酮通過(guò)調(diào)節(jié)CyclinB1和CDK1的表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞G2/M期阻滯從而抑制癌細(xì)胞增殖。
　　(3)通過(guò)WesternB

4、lotting檢測(cè)吉馬酮對(duì)抑癌基因P53表達(dá)情況,并檢測(cè)凋亡相關(guān)基因Bcl-2家族中的Bax、Bcl-2的影響,其結(jié)果顯示吉馬酮能夠增強(qiáng)抑癌基因P53的表達(dá),并促進(jìn)促凋亡因子Bax的表達(dá)量上升,抗凋亡因子Bcl-2的表達(dá)量隨藥物濃度增加而下降。
　　(4)通過(guò)Hoechst33258染色檢測(cè)吉馬酮對(duì)HepG2細(xì)胞發(fā)生凋亡的影響,結(jié)果表明著色細(xì)胞明顯增多,并且通過(guò)PI/AnnexinV雙染流式檢測(cè)吉馬酮對(duì)HepG2細(xì)胞發(fā)生凋亡的影響

5、,結(jié)果發(fā)現(xiàn)正常細(xì)胞比例明顯下降,早期凋亡和晚期凋亡細(xì)胞比例明顯上升,這些結(jié)果都說(shuō)明吉馬酮能夠促進(jìn)HepG2細(xì)胞發(fā)生凋亡。
　　(5)通過(guò)Western Blotting檢測(cè)JAKs/STATs信號(hào)通路中p-JAK2和p-STAT3的表達(dá)情況,結(jié)果表明p-JAK2和p-STAT3的表達(dá)量隨著藥物濃度的增加而下降,說(shuō)明吉馬酮能夠能夠有效抑制JAK2/STAT3信號(hào)通路的異常活化,從而達(dá)到抑制腫瘤發(fā)生的目的。
　　通過(guò)以上結(jié)果表明