1、動脈粥樣硬化是嚴重影響人類健康的疾病,目前公認,動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性疾病,動脈血管的損傷與內皮細胞、平滑肌細胞在炎癥因子等危險因素刺激下許多功能失代償有關其中包括了增值、凋亡、自噬等功能的失代償,而脂類代謝紊亂恰好參與了動脈粥樣樣硬化的炎癥機制。APOL1是近些年發(fā)現(xiàn)的新型載脂蛋白,其血漿濃度與高脂血癥相關,其自噬功能可能與斑塊穩(wěn)定相關,故APOL1可能與動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展有關。但是APOL1在動脈粥樣硬化中的具體作用及自身

2、調控機制目前尚不清楚,因此,APOL1自身調控的機制研究顯得尤為重要,進而為其在血脂代謝中的作用、其自噬功能在動脈粥樣硬化中發(fā)生發(fā)展中的作用及機制研究做準備。本實驗成功夠建了APOL1調控區(qū)(-1918nt~+265nt)及各分段的克隆,將其通過轉染的方法導入細胞,通過雙熒光素酶報告檢測試驗發(fā)現(xiàn)APOL1的調控區(qū)-1918nt~+265nt在肝癌Huh7細胞株轉錄活性最強;-80nt~+265nt幾乎保留了調控區(qū)-1918nt~+265

3、nt全部轉錄活性。將調控區(qū)-80nt~+265nt利用TESS、TFsearch、TFbind、JASPAR軟件預測,確定了5個潛在的轉錄因子結合位點SP/KLF(1)、SP/KLF(2)、HNF3、IRF、INR。將潛在轉錄因子結合位點通過定點突變的方法進行突變,除了SP/KLF(2)位點外其余的4個轉錄活性都降低了。將INF-γ干預Huh7細胞,發(fā)現(xiàn)其對APOL1轉錄的上調作用主要是通過IRF轉錄因子結合位點發(fā)揮作用的。結論:1、初