S-腺苷蛋氨酸對LX-2肝星狀細胞增殖的影響及機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察S-腺苷蛋氨酸(SAMe)對LX-2肝星狀細胞株(HSC)增殖的影響,探討S-腺苷蛋氨酸對轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)誘導(dǎo)的肝星狀細胞TGF-β1-Smad信號傳導(dǎo)通路的影響。
  方法:體外培養(yǎng)人源LX-2-HSC,CCK-8實驗檢測SAMe對其增殖的影響,并選擇其中3種有效濃度用于觀察S-腺苷蛋氨酸對轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)誘導(dǎo)的肝星狀細胞TGF-β1-Smad信號傳導(dǎo)通路的影響。實驗共分5組,A組:空白

2、組,B組:TGF-β1組(濃度為10ng/ml),C組:SAMe(2mmol/L)+TGF-β1組(濃度為10ng/ml),D組:SAMe(4mmol/L)+TGF-β1組(濃度為10ng/ml),E組:SAMe(8mmol/L)+TGF-β1組(濃度為10ng/ml)。采用western-blot方法檢測SAMe對TGF-β1誘導(dǎo)的HSC表達Ⅰ型膠原蛋白(COL-1)及TGF-β1信號傳導(dǎo)相關(guān)分子Smad3、Smad4的影響。

3、  結(jié)果:(1)CCK-8實驗表明lmM SAMe組同對照組之間比較,LX-2肝星狀細胞增殖差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.145);其余各濃度組同對照組間的差異均存在統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且不同濃度組之間的差異均有或近似有統(tǒng)計學(xué)意義。(2)Western-blot檢測Ⅰ型膠原蛋白結(jié)果表明,TGF-β1組顯著增加了Ⅰ型膠原蛋白的表達(P<0.05),加入SAMe組顯著抑制了TGF-β1誘導(dǎo)的HSCⅠ型膠原蛋白表達(P>0.05),且SA

4、Me濃度越大抑制作用越明顯。(3)Western-blot檢測Smad3結(jié)果表明,TGF-β1組有增加HSC內(nèi)Smad3的趨勢(P=0.8064),加入SAMe組顯著抑制了HSC細胞內(nèi)Smad3的產(chǎn)生,且濃度越大抑制越明顯。(4)Western-blot檢測Smad4結(jié)果表明TGF-β1組顯著增加了Smad4的表達(P<0.05),加入SAMe組顯著抑制了HSC細胞內(nèi)Smad4的產(chǎn)生(除C組外,其余P<0.05)且濃度越大抑制越明顯

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