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文檔簡介
1、多年的童期生長對木本植物,尤其是經濟作物果樹來說一直是備受關注的問題。如何能夠有效的縮短果樹的童期,進而提高育種效率,是果樹分子生物學研究的重要課題。七十年代末發(fā)現(xiàn)于我國宜昌境內某苗圃的一株枳殼的突變體,因其具有比普通枳殼更矮化,童期更短并且可以在一年內多次開花的特性而被命名為早實枳(Early poncirus)。早實枳童期短及花芽形成快的特性引起了我們的關注,我們期望能從對早實枳和枳殼的比較研究當中發(fā)現(xiàn)與其早花表型相關的分子機理,從
2、而為柑橘從營養(yǎng)生長向生殖生長轉換過程給出科學的解釋,為進一步表型調控和分子育種提供基礎。 FLOWER LOCUST(FT)基因在植物調控開花的基因網(wǎng)絡中作為同時應答于光信號和春化信號的調控節(jié)點,發(fā)揮著整合外界環(huán)境光信號和溫度信號的重要作用。CONSTANS(CO)是刀的上游光周期調控基因,而TERMINAL FLOWER(TFL)基因是與刀序列相似、作用相反的開花抑制因子。 本研究以木本植物枳殼及其早花突變體-早實枳為
3、材料,對上述三個基因進行了克隆與表達分析,主要結果如下: 1.克隆得到枳殼和早實枳CO基因621bp的cDNA片段;與擬南芥的CO的核苷酸序列的同源性達到70%,依據(jù)推測的氨基酸序列與其他植物CO同源基因的聚類分析表明,CO基因在進化過程中有較強的保守性。 2.克隆得到枳殼和早實枳刀的全長基因;基因全長626bp,與溫州蜜柑的FT基因序列僅有4個堿基的差異,與擬南芥的FT氨基酸序列比較同源性為74%。 3.克隆得
4、到枳殼和早實枳長606bp的TFL同源基因;它與甜橙的TFL基因序列僅有10個堿基的差異,與擬南芥的TFL氨基酸序列比較同源性為73%。 4.早實枳與普通枳中,TFL與FT基因的堿基序列與拷貝數(shù)沒有差異。 5.通過半定量RT-PCR方法對上述3基因的表達分析發(fā)現(xiàn),CO和刀基因在枳殼和早實枳中的表達有一定的相關性;童期TFL基因表達量高與其維持花芽的未分化狀態(tài)的功能相一致;成花期刀的表達也印證了其促進開花的功能。
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