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文檔簡介
1、目的:觀察大黃附子湯對大鼠失血性休克復蘇后小腸粘膜CD3+、γδT細胞、防御素-5(RD-5)及分泌性免疫球蛋白A(SIgA)的影響,探討大黃附予湯對大鼠失血性休克復蘇后腸道粘膜免疫屏障功能的保護作用及機理。
方法:健康清潔級雄性SD大鼠,72只,隨機分為3組:對照組、模型組、大黃附子湯組,每組24只,各組再按失血性休克模型制備成功后0、6、12h分為三個亞組,每組8只大鼠。對照組依次行腹腔麻醉,右頸總動脈、右股靜脈、左股
2、動脈插管及全身肝素化,空腸造瘺后關腹,于關腹后即刻、3、6h分別予以生理鹽水2ml保留灌腸。模型組和大黃附子湯組分別在對照組基礎上采用Wiggers改良法制備HS大鼠模型。模型組和大黃附子湯組分別在復蘇后即刻、3、6h分別予以生理鹽水、大黃附子湯2ml保留灌腸。三組分別于0、6、12h處死動物前采用激光散斑技術監(jiān)測回腸末端血流量,并經(jīng)右股靜脈取血,采用ELISA法測定血清中腸脂肪酸蛋白(IFABP)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的水平
3、,采用動態(tài)比濁法檢測血清中內(nèi)毒素(LPS)的水平。各組按時間點處死大鼠,分別取距回盲部交界處近側(cè)10cm的末端回腸各10cm,分離提取小腸粘膜CD3+、γδT細胞,應用流式細胞儀檢測小腸粘膜CD3+、γδT細胞百分比;另取大鼠末端回腸重約100mg,用于分離提取大鼠防御素-5(RD-5) mRNA,進行RT-PCR;最后另取大鼠回腸組織,光鏡下觀察各組大鼠小腸粘膜組織形態(tài)學的改變。
結(jié)果:(1)大黃附子湯對大鼠末端回腸血流
4、量的影響:與對照組比較,模型組在失血性休克1h時大鼠末端回腸血流量明顯下降,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);與模型組比較,大黃附子湯組的血流量在6、12h時明顯升高,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(2)大鼠末端回腸CD3+細胞含量百分比的變化:與對照組比較,模型組在休克1h時,大鼠末端回腸CD3+細胞含量百分比明顯減少,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);與模型組比較,大黃附子湯組大鼠末端回腸CD3+細胞含量百分比在6h
5、升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),在12h時明顯升高,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(3)大鼠末端回腸γδT細胞含量百分比的變化:與對照組比較,模型組在休克1h時,大鼠末端回腸γδT細胞含量百分比明顯減少,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);與模型組比較,大黃附子湯組大鼠末端回腸γδT細胞含量百分比在6h時升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),在12h時明顯升高,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(4)大鼠末端回腸
6、RD-5的表達變化:與對照組比較,模型組在失血性休克1h時RD-5的表達明顯升高,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);與模型組比較,大黃附子湯組的RD-5表達在6、12h時明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。(5)血清中SIgA含量的變化:與對照組比較,模型組在休克1h時,大鼠血清中SIgA含量明顯減少,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);與模型組比較,大黃附子湯組大鼠血清中SIgA含量在6h升高,差異有統(tǒng)計學
7、意義(P<0.05),在12h時明顯升高,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(6)血清中IFABP含量的變化:與對照組比較,模型組在休克1h時,大鼠血清中IFABP含量明顯升高,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);與模型組比較,大黃附子湯組大鼠血清中IFABP含量在6h降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),在12h時明顯降低,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(7)血清中LPS含量的變化:與對照組比較,模型組在休克1h時,大
8、鼠血清中LPS含量明顯升高,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);與模型組比較,大黃附子湯組大鼠血清中LPS含量在6h降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),在12h時明顯降低,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
結(jié)論:(1)失血性休克復蘇后大鼠末端回腸血流量明顯地下降,腸粘膜CD3+、γδT的細胞含量百分比顯著地降低,末端回腸RD-5 mRNA的表達反應性增加,同時血清中SIgA的濃度下降,提示失血性休克時腸道粘膜免
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