1、研究背景及目的:
　　自1983年Marshall和Warren成功分離并培養(yǎng)了幽門螺桿菌(Helicobacterpylori，Hp)以來，關(guān)于其與許多慢性胃疾病、癌前病變以及胃癌發(fā)生的相關(guān)性及其機(jī)制問題成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。Hp既能導(dǎo)致胃上皮細(xì)胞的凋亡，同時(shí)刺激其代償性增殖，因此由Hp感染而導(dǎo)致的胃上皮細(xì)胞更新率（凋亡或增殖）的改變可能是胃癌發(fā)生的重要機(jī)制，然而Hp對(duì)胃上皮細(xì)胞以及不同胃癌細(xì)胞增殖凋亡情況的影響及具體機(jī)制尚不十

2、分清楚。本研究旨在通過構(gòu)建胃上皮細(xì)胞GES-1、人胃腺癌細(xì)胞株SGC-7901、人低分化胃腺癌細(xì)胞系MGC-803、人胃癌細(xì)胞株BGC-823Hp體外感染模型，觀察HpⅠ型菌株(CagA+，VacA+)對(duì)上述細(xì)胞形態(tài)、增殖、以及細(xì)胞凋亡的影響，并探討其可能機(jī)制，研究Hp感染在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用，為胃癌的臨床診斷和防治提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　將胃上皮細(xì)胞GES-1、人胃腺癌細(xì)胞株SGC-7901、人低分化胃腺癌細(xì)胞

3、系MGC-803、人胃癌細(xì)胞株BGC-823分別與不同MOI(multiplicity of infection)的HpⅠ型菌株(CagA+，VacA+)培養(yǎng)24h、48h。進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)分析:
　　(1)倒置顯微鏡下觀察上述四種細(xì)胞在不同MOI、不同培養(yǎng)時(shí)間的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;
　　(2)MTT法檢測(cè)四種細(xì)胞在不同MOI、不同培養(yǎng)時(shí)間的細(xì)胞生長(zhǎng)情況，分析Hp對(duì)四種細(xì)胞增殖情況的影響;
　　(3)流式細(xì)胞儀分析上述四種細(xì)胞

4、細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)、增殖指數(shù)(PI)、細(xì)胞周期;
　　(4)Western-blot方法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3，Caspase-9及增殖相關(guān)蛋白P53，P21、E2F-1表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　(1)倒置顯微鏡下觀察四種細(xì)胞與Hp共同培育后細(xì)胞正常形態(tài)發(fā)生改變，且隨著細(xì)菌數(shù)目增加，細(xì)胞形態(tài)失常更加明顯。
　　(2)MTT細(xì)胞增殖活性檢測(cè)顯示四種細(xì)胞株經(jīng)Hp處理后，細(xì)胞增殖活性受到不同程度抑制，其

5、中正常胃上皮細(xì)胞株GES-1抑制明顯，且隨時(shí)間增加、細(xì)菌數(shù)目增多抑制效應(yīng)明顯，而SGC-7901、MGC-803、 BGC-823三種細(xì)胞系抑制率隨Hp數(shù)目、培育時(shí)間變化呈輕微改變。
　　(3)流式細(xì)胞學(xué)(FCM)檢測(cè)在Hp處理后四種細(xì)胞系凋亡指數(shù)升高，增殖指數(shù)升高，呈不同比例的S期細(xì)胞增多，G1期細(xì)胞減少現(xiàn)象。
　　(4)Western-blot檢測(cè)顯示經(jīng)Hp處理后，四種細(xì)胞系Caspase-3，Caspase-9表達(dá)量不