1、核酸擴(kuò)增技術(shù)是生化分析檢測的熱門研究領(lǐng)域，迄今為止已經(jīng)發(fā)展出了眾多基于核酸擴(kuò)增的檢測方法。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase chain reaction，PCR)及其衍生技術(shù)，需要經(jīng)過循環(huán)的變溫過程，對(duì)儀器依賴性強(qiáng)，在現(xiàn)場快速檢測等領(lǐng)域的應(yīng)用具有一定的局限性;因此，發(fā)展簡便快速、靈敏準(zhǔn)確的等溫核酸擴(kuò)增技術(shù)具有非常重要的意義。本論文中，在以往鏈置換擴(kuò)增的基礎(chǔ)上，于完全等溫條件下建立了一種指數(shù)式擴(kuò)增檢測雙鏈核酸的新方法，并對(duì)該類型反應(yīng)所

2、出現(xiàn)的非特異性擴(kuò)增進(jìn)行了研究。
　　本論文中，將切刻酶和聚合酶聯(lián)合使用，在完全等溫的條件下建立了一種擴(kuò)增檢測雙鏈核酸的新方法。該方法實(shí)現(xiàn)了單鏈靶標(biāo)的產(chǎn)生與擴(kuò)增在封閉體系中及同一溫度下進(jìn)行，不需要額外的預(yù)變性等操作步驟，方法簡便快速，靈敏準(zhǔn)確。應(yīng)用該方法對(duì)pBluescriptⅡ KS(+)質(zhì)粒（簡稱為PBS質(zhì)粒）DNA進(jìn)行了檢測，當(dāng)目標(biāo)DNA濃度為1.0 fmol到1.0zmol時(shí)，檢測結(jié)果具有良好的線性關(guān)系;并且方法在復(fù)雜體系進(jìn)

3、行檢測時(shí)，也表現(xiàn)出了較好的穩(wěn)定性。為了檢測該方法的實(shí)際應(yīng)用能力，本論文對(duì)副溶血性弧菌進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示，該方法可以將約100zmol的基因組DNA檢測出來，證明了本方法具有一定的實(shí)際應(yīng)用能力。
　　為了進(jìn)一步提高應(yīng)用本方法檢測副溶血性弧菌的靈敏度，本論文探討了應(yīng)用分子信標(biāo)代替Sybr GreenⅠ進(jìn)行信號(hào)檢測的可行性;同時(shí)，為了探究該類型反應(yīng)出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增的原因，本論文對(duì)含有切刻酶識(shí)別序列的引物所引起的非特異性擴(kuò)增進(jìn)行了研究，