1、目的：常染色體顯性遺傳多囊腎病嚴(yán)重危害人類的健康，PKD1和PKD2基因突變所致基因序列閱讀框改變是引起常染色體顯性遺傳多囊腎病發(fā)生的重要原因。本研究擬用多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)篩查常染色體顯性遺傳多囊腎病患者，對可能存在的缺失突變患者和重復(fù)突變患者做出輔助診斷。
　　 方法：選擇20例常染色體顯性遺傳多囊腎患者，經(jīng)B超或CT證實為多囊腎，抽取全血樣本；3例健康志愿者的血液樣本作為正常對照。采用血液基因組DNA提取試劑盒抽提全部實驗

2、樣本的DNA。采用多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)檢測所有樣本的PKD1基因和PKD2基因。多重連接探針擴(kuò)增結(jié)果顯示為單一外顯子擴(kuò)增或可疑擴(kuò)增的樣本，針對該外顯子設(shè)計引物，采取實時定量PCR方法進(jìn)行結(jié)果驗證。多重連接探針擴(kuò)增結(jié)果顯示為單一外顯子缺失或可疑缺失的樣本，針對相應(yīng)的多重連接探針擴(kuò)增連接位點設(shè)計引物，采用普通PCR的方法進(jìn)行驗證，若存在擴(kuò)增產(chǎn)物則進(jìn)行測序驗證。
　　 結(jié)果：多重連接探針擴(kuò)增實驗中,20例常染色體顯性遺傳多囊腎患者外周

3、血樣本的數(shù)據(jù)經(jīng)過與同批次的正常樣本進(jìn)行對比分析后發(fā)現(xiàn)1 例外顯子缺失，5例外顯子疑似缺失，3例外顯子疑似重復(fù)，余為陰性。
　　 采用實時定量PCR方法、普通PCR方法及基因測序進(jìn)行驗證后，發(fā)現(xiàn)6號樣本中PKD1基因第40外顯子有一個錯義突變C11541A，導(dǎo)致對應(yīng)的氨基酸由蘇氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)樘於０罚ˋCC>AAC）；發(fā)現(xiàn)17號樣本PKD2基因第8外顯子發(fā)生缺失突變；在1例患者中發(fā)現(xiàn)重復(fù)突變，7號樣本PKD1基因6號外顯子的表達(dá)較正常

4、人上調(diào)3.839倍。
　　 結(jié)論：本研究在國內(nèi)率先使用多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)對常染色體顯性遺傳多囊腎病患者進(jìn)行PKD1/PKD2基因外顯子缺失與擴(kuò)增篩查,建立了多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)檢測常染色體顯性遺傳多囊腎病基因的實驗方法，并優(yōu)化了實驗條件。在常染色體顯性遺傳多囊腎病的基因診斷中，多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)既有其優(yōu)勢，也發(fā)現(xiàn)了一些局限性。
　　 實時定量PCR、普通PCR及基因測序進(jìn)一步驗證，可使得PKD1/PKD2基因檢測更為