1、細(xì)胞色素P4502C9(CYP2C9)是一種多態(tài)性酶，負(fù)責(zé)代謝許多臨床藥物，包括非甾體抗炎藥、抗抑郁藥、降糖藥、心血管藥物和口服抗凝劑。CYP2C9酶活性在不同人群中存在個(gè)體差異，主要是因?yàn)镃YP2C9基因存在非同義單核苷酸多態(tài)性(SNPs)。CYP2C9*3和CYP2C9*13是存在于中國(guó)人群中最主要的兩個(gè)突變等位基因，其分布頻率分別為3.3％和1.02％。有文獻(xiàn)報(bào)道，CYP2C9*3突變?cè)斐呻p氯芬酸代謝活性的降低，并且能夠改變雙氯芬

2、酸與其他藥物間發(fā)生藥物藥物相互作用(DDIs)的程度，從而引起帶有該突變等位基因的個(gè)體發(fā)生潛在的藥物不良反應(yīng)(ADPs)。但是關(guān)于CYP2C9*13對(duì)雙氯芬酸代謝的影響還沒有很好的研究，并且對(duì)于該突變是否影響雙氯芬酸和其他臨床藥物的相互作用未見報(bào)道。與CYP2C9*3在體內(nèi)的大量研究不同，由于CYP2C9*13分布頻率相對(duì)較低，攜帶有CYP2C9*13基因型的個(gè)體很難收集，這就使得對(duì)該突變的臨床研究很受限制，因此，通過體外代謝數(shù)據(jù)預(yù)測(cè)C

3、YP2C9*13引起的體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)變化是一項(xiàng)非常重要的研究工作。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，關(guān)于CYP2C9基因多態(tài)性對(duì)各種藥物代謝動(dòng)力學(xué)影響的預(yù)測(cè)方法已成功建立，但是關(guān)于CYP2C9*13對(duì)不同藥物的體外代謝數(shù)據(jù)報(bào)道較少，因此對(duì)于該突變的體內(nèi)預(yù)測(cè)也未見報(bào)道。
　　 CYP2C9基因多態(tài)性能夠顯著影響CYP2C9介導(dǎo)的藥物相互作用的程度。體外研究表明，CYP2C9*3能夠改變?cè)S多臨床藥物對(duì)CYP2C9酶參與代謝其他藥物的抑制潛能。體內(nèi)研究表

4、明，CYP2C9*3影響氟比洛芬和氟康唑的相互作用程度。到目前為止，關(guān)于CYP2C9*13對(duì)雙氯芬酸與其他藥物相互作用的影響未見報(bào)道。了解CYP2C9基因突變對(duì)藥物間相互作用的影響，能夠幫助攜帶有不同CYP2C9基因型的個(gè)體，在聯(lián)合使用雙氯芬酸和其他藥物時(shí)，避免ADRs的發(fā)生。
　　 本研究通過CYP2C9.1(野生型)、CYP2C9.3和CYP2C9.13在酵母細(xì)胞中的表達(dá)，確定了這三個(gè)重組酶代謝雙氯芬酸生成4'-羥基雙氯芬酸

5、的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。根據(jù)這些體外數(shù)據(jù)，我們預(yù)測(cè)了帶有CYP2C9*3或CYP2C9*13基因型的個(gè)體對(duì)雙氯芬酸口服清除率的比值(與野生型比值，CLoralR)。結(jié)果表明這些突變都不同程度地降低了雙氯芬酸口服清除率。此外，我們探索了CYP2C9*3和CYP2C9*13對(duì)雙氯芬酸與九種臨床藥物相互作用的影響，并將這些影響與野生型比較，結(jié)果表明，CYP2C9*3和CYP2C9*13能夠不同程度地改變大部分藥物(抑制劑)對(duì)CYP2C9酶代謝雙氯芬酸的

6、抑制程度，尤其是CYP2C9*13能夠明顯降低磺胺苯吡唑、氟伐他汀、氟伏沙明和反苯環(huán)丙胺的抑制能力。本研究結(jié)果為攜帶有CYP2C9*3和CYP2C9*13等位基因的個(gè)體在聯(lián)合服用雙氯芬酸與其他藥物時(shí)，提供了可靠的理論指導(dǎo)。在基因分型的研究中，我們考察了74名中國(guó)人CYP2C9*3等位基因分布情況。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)一限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)分析法檢測(cè)74名中國(guó)人CYP2C9*3基因型，并且對(duì)PCR產(chǎn)物直接測(cè)序驗(yàn)證酶切結(jié)