1、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（coronary heart disease，CHD）是人群常見病和多發(fā)病，由不良生活習(xí)慣、環(huán)境與遺傳等多方面因素綜合所致，是一種多基因遺傳性疾病。研究CHD的遺傳易感基因?qū)τ陂_展針對性的人群預(yù)防，延緩或防止冠心病的發(fā)生具有重要的意義。隨著分子生物學(xué)的迅速發(fā)展及人類基因組計劃的進行，尋找CHD易感基因并從基因水平闡明CHD發(fā)病機制成為醫(yī)學(xué)研究的熱點。這些基因中有脂質(zhì)代謝基因如載脂蛋白E基因、載脂蛋白A基因、載脂

2、蛋白B基因等，有腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)中的血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)換酶（ACE）和血管緊張素Ⅱ基因等，有纖溶酶原激活物抑制劑（PAI-1）基因，還有內(nèi)源性基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑（TIMP）基因、內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因、E選擇素基因等。研究這些基因與CHD的關(guān)系均是從這些基因的基因多態(tài)性與CHD的關(guān)系著手。 人細(xì)胞色素酶P450（Cytochrome P450，CYP450）是一組酶系，是重要的人肝臟藥物代謝酶，是一組參與涉及到許多外源

3、性物質(zhì)和內(nèi)源性物質(zhì)代謝的酶系。CYP450蛋白由CYP基因超家族編碼。這組酶系包括許多家族與亞家族，CYP2C9即是CYP2C亞家族中的一種。CYP2C9酶蛋白分子量約55kD，包含約500個氨基酸殘基。CYP2C9蛋白主要分布于肝臟，在小腸、呼吸道、腦、血管和腎臟等其他部位中也有表達，約占總CYP蛋白量的20%。 CYP2C9蛋白由CYP2C9基因編碼，人CYP2C9基因位于染色體10q24.2上，全長50.71kb，有9個

4、外顯子，8個內(nèi)含子。CYP2C9基因開放讀碼區(qū)存在著多態(tài)性，在分子生物學(xué)上視為單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）。CYP2C9基因多態(tài)性包括以下種類，從CYP2C9*1（野生型），CYP2C9*2型，CYP2C9*3型，……到CYP2C9*30型等。不同人群中CYP2C9基因變異有不同的分布，在中國人群中，CYP2C9基因型主要為CYP2C9*1（野生型）和CYP2C9*3型（突變型）

5、。突變型CYP2C9*3基因型是第1075位堿基發(fā)生了A>C突變，使得編碼多肽鏈第359位異亮氨酸的密碼子ATT突變?yōu)榱涟彼崦艽a子CTT。 CYP2C9參與多種藥物的代謝，其催化的藥物種類約占臨床常用藥物12%。如苯妥英、華法林、甲苯磺丁脲、氯沙坦等。同時CYP2C9還參與了多種外來致癌物和致突變物的代謝，如喹啉、丁二烯。除了外源性物質(zhì)，CYP2C9在動脈血管細(xì)胞中參與了從花生四烯酸（arachidonic acids）合成環(huán)

6、氧花生酸（epoxyeicosatrienoic acids，EET）的代謝。EET是一種內(nèi)皮衍生性超極化因子（endothelium-derived hyperpolarizing factor，EDHF），在血管平滑肌細(xì)胞中，EET能夠促進Ca2+的流入，并且能夠激活Ca2+依賴的K+-Ca2+離子通道引起超極化，進而引起血管擴張和降低血壓，并對血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞功能產(chǎn)生影響。血脂作為經(jīng)肝臟合成、代謝的一種重要內(nèi)外源性物質(zhì)，其

7、代謝可能和CYP2C9存在聯(lián)系。 CYP2C9基因多態(tài)性引起了個體中CYP2C9蛋白結(jié)構(gòu)的變化，從而引起了蛋白活性的變化，已有的研究表明其突變型蛋白的活性低于野生型。蛋白活性的變化，造成了對某些藥物代謝能力遺傳性的多態(tài)性，攜帶有突變型基因的個體代謝藥物的能力較攜帶野生型基因個體低。同時，這種多態(tài)性造成機體對外來致癌物和致突變物的代謝能力的差異，也會對機體生成EET的能力產(chǎn)生不同影響，如CYP2C9*3突變型個體的CYP2C9酶

8、催化合成EET的能力較CYP2C9*1野生型個體低，進而對某些疾病的發(fā)生、發(fā)展產(chǎn)生不同影響。這種多態(tài)性與某些疾病的發(fā)生有相關(guān)性，如肺癌和急性心肌梗死。 目的: 1.探討CYP2C9基因多態(tài)性和冠心病間是否存在關(guān)系。 2.探討CYP2C9基因多態(tài)性和血脂之間是否存在關(guān)系及關(guān)系如何。 對象及方法: 對象: 所有研究對象均為我院住院病人，對患者行冠狀動脈造影，將冠狀動脈狹窄程度≥50%或者有明確

9、的心肌梗死病史者列為冠心病組，而將冠狀動脈血管造影正常者列為對照組。所有對象均為漢族，研究個體間無血緣關(guān)系，且均排除肝、腎、腫瘤、甲狀腺、糖尿病等疾病。冠心病組218例，對照組200例。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析兩組年齡、性別、吸煙率、高血壓發(fā)生率等條件具有可比性。 方法: 實驗對象于服用降脂藥物前空腹8小時以上，取靜脈血采用標(biāo)準(zhǔn)酶比色法測定總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三脂（triglyceride，TG

10、）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C），用免疫濁度法測定載脂蛋白A1（apoA1）和載脂蛋白B（apoB）及脂蛋白（a）。另取5ml靜脈血置于EDTA-K2抗凝管按人血液DNA提取試劑盒操作步驟提取白細(xì)胞基因組DNA，所提DNA采取聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法對CY

11、P2C9基因目的片段進行擴增，PCR產(chǎn)物送上海英駿生物技術(shù)有限公司直接測序進行基因型分型。并對所有實驗對象中的CYP2C9*3基因型者和與之條件相匹配的相同數(shù)量的CYP2C9*1基因型者的血脂水平進行比較。采用兩獨立樣本t檢驗比較冠心病組和對照組實驗對象的年齡差異，四格表資料的X2檢驗比較冠心病組和對照組的男性百分比、吸煙率、高血壓發(fā)生率，采用四格表資料的X2檢驗比較冠心病組和對照組的CYP2C9*3基因型頻率及等位基因頻率，符合條件的

12、CYP2C9*3基因型者和CYP2C9*1基因型者的血脂水平比較采用兩樣本t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果: 1.檢測到的所有突變型CYP2C9*3基因型均為CYP2C9*1/CYP2C9*3雜合子，未檢測到CYP2C9*3/CYP2C9*3型純合子。 2.冠心病組突變型CYP2C9*3基因型檢出率為8.26%，高出對照組檢出率3.50%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.040），冠心病組CYP2C9*3

13、等位基因頻率4.13%也顯著高于對照組1.75%（P=0.044）。 3.CYP2C9*3基因型（突變型）者和CYP2C9*1基因型（野生型）者間血脂、脂蛋白水平經(jīng)統(tǒng)計學(xué)比較無顯著性差異。 結(jié)論: 1.漢族人群中CYP2C9*3基因型突變主要為CYP2C9*1/CYP2C9*3雜合子突變。 2.CYP2C9*3突變型基因型在冠心病組檢出率高于對照組檢出率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.040）。冠心病組CYP