骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分:大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)與誘導(dǎo)成骨分化及鑒定
  背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有多向分化潛能,但在骨髓中含量極低,收集足夠數(shù)量的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,對組織工程及細(xì)胞的體內(nèi)、外實驗至關(guān)重要。
  目的:通過體外獲取和培養(yǎng)純度高、生物特性均一的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,并向成骨誘導(dǎo)分化,為后續(xù)實驗做準(zhǔn)備。
  方法:通過全骨髓貼壁法分離、培養(yǎng)、純化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面標(biāo)記物,鑒定后將所

2、有骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨誘導(dǎo)分化。結(jié)果:大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長以梭形細(xì)胞為主,呈放射狀排列的細(xì)胞集落,可連續(xù)穩(wěn)定傳代6代以上。第3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞CD44呈陽性表達(dá),而CD45呈陰性。成骨誘導(dǎo)后,經(jīng)茜素紅染色結(jié)果為陽性。所得細(xì)胞總數(shù)為2.0×108個,純度達(dá)99.27%。
  結(jié)論:全骨髓貼壁培養(yǎng)法操作簡單,可大量分離、純化、擴(kuò)增骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,所獲細(xì)胞具有間充質(zhì)干細(xì)胞的一般生物學(xué)特性,經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)后向成骨誘導(dǎo)分化,可為后續(xù)實

3、驗提供基礎(chǔ)。
  第二部分骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療去勢大鼠骨質(zhì)疏松的研究
  目的:探討去勢骨質(zhì)疏松大鼠股骨骨髓腔注入骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對股骨骨密度、生物力學(xué)及骨微結(jié)構(gòu)的影響。
  方法:將32只六月齡雌性SD大鼠隨機(jī)分為:假切(Sham)對照組12只和骨質(zhì)疏松組20只,雙側(cè)卵巢切除術(shù)后3個月兩組各隨機(jī)取4只大鼠處死后測股骨骨密度,再將骨質(zhì)疏松組隨機(jī)分成單純?nèi)荩∣VX)組及去勢+骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組(OVX+MSC)組各8只

4、,OVX+MSC組大鼠雙側(cè)股骨骨髓腔注入誘導(dǎo)分化的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,Sham組與OVX組骨髓腔注入等量的PBS液,兩個月后取三組大鼠股骨行骨密度檢測、三點(diǎn)彎曲生物力學(xué)測試及骨形態(tài)計量學(xué)分析。
  結(jié)果:
  卵巢切除術(shù)后3個月測股骨骨密度證實造模成功,股骨骨密度檢測、三點(diǎn)彎曲生物力學(xué)試驗及骨形態(tài)計量學(xué)分析結(jié)果示Sham組、OVX組及OVX+MSC組組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P﹤0.05)。
  結(jié)論:
  股骨骨髓腔

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