1、纖維素是自然界中存在最廣泛的一類碳水化合物，同時它也是地球上數量最大的可再生資源。目前，自然界中纖維素只有一小部分得到了利用，絕大多數纖維素不僅被白白浪費，而且對環(huán)境造成了污染。利用微生物生產的纖維素酶將其轉化為人類急需的能源、食物和化工原料，對于人類社會解決環(huán)境污染、食物短缺和能源危機具有重大的現實意義。將里氏木霉纖維素酶內切葡萄糖苷酶基因，用基因工程方法高效分泌表達，并研究其酶學性質，為改進酶學活性提供研究參數，奠定基礎。
　

2、　 目前纖維素的研究已經日趨成熟，但對于里氏木霉內切葡萄糖苷酶的純化和酶學性質的研究甚少。本文成功的克隆了里氏木霉內切葡萄糖苷酶EGI基因，將其連接到pPIC9K載體，構建了分泌表達型畢赤酵母質粒pPIC9K-egl，并把它整合到了畢赤酵母基因組中，利用甲醇對陽性轉化子進行了較為系統(tǒng)的誘導表達條件優(yōu)化，確立了最佳表達條件為：30℃下，誘導劑濃度為2％，接種量為OD6002.5，氮源為1.0％的蛋白胨，搖床轉速為200rpm，起始培養(yǎng)基

3、PH為6.0時酶的活性最高，最大酶活出現在甲醇誘導表達48 h-60h之間。
　　 在搖瓶優(yōu)化條件的基礎上，對畢赤酵母重組子GS115/egl進行了5L發(fā)酵罐的高密度培養(yǎng)。將發(fā)酵上清超濾濃縮后，采用離子交換的方法進行分離純化，制備純酶，并測定其活性和酶學性質。純化后的酶活性為0.892U/mL，比酶活為11.952U/mg，比未純化前提高了1.82倍。經過酶學性質分析結果顯示，重組EGI催化反應酶活力的最適溫度為50℃，最適pH