1、該實驗研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法證實趨化因子受體CXCR4在伴有肺轉(zhuǎn)移的涎腺腺樣囊性癌原發(fā)灶中明顯陽性,在其它口腔癌的原發(fā)灶也表達(dá)增高;淋巴轉(zhuǎn)移灶中趨化因子受體CXCR4及其配體CXCL12有明顯增高表達(dá);同時可見CXCR4和CXCL12在癌組織和癌旁組織中的微血管內(nèi)皮細(xì)胞上有陽性表達(dá)的現(xiàn)象.應(yīng)用單抗標(biāo)記流式細(xì)胞儀和Western blot檢測了CXCR4在ACC-M(人涎腺腺樣囊性癌肺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)、ACC-2(人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞株)

2、、Tca8113(人舌癌細(xì)胞株)細(xì)胞上的表達(dá),其中細(xì)胞株ACC-M顯著性表達(dá)CXCR4受體,陽性率為87.76％;CXCR4的配體CXCL12對ACC-M、ACC-2和Tca8113具有趨化作用,這種趨化效應(yīng)在ACC-M上表現(xiàn)最為明顯,其次為ACC-2;CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100對CXCL12的趨化作用具有顯著性抑制效應(yīng).通過細(xì)菌內(nèi)同源重組機(jī)制,依據(jù)攜帶CXCR4基因的質(zhì)粒,應(yīng)用細(xì)菌同源重組系統(tǒng):大腸桿菌BJ5183、DH1

3、0B和穿梭質(zhì)粒pShuttle-CMV以及腺病毒骨架質(zhì)粒pAdEasy-1,成功構(gòu)建了能夠進(jìn)行CXCR4基因轉(zhuǎn)移的重組腺病毒載體pAdCXCR4.應(yīng)用重組腺病毒載體pAdCXCR4對ACC-2細(xì)胞低表達(dá)CXCR4單克隆細(xì)胞株轉(zhuǎn)染,經(jīng)檢測驗證轉(zhuǎn)染后細(xì)胞確實表達(dá)有生物活性的受體CXCR4.轉(zhuǎn)染細(xì)胞體內(nèi)接種實驗結(jié)果證明,上調(diào)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞的CXCR4表達(dá),則導(dǎo)致肺轉(zhuǎn)移的明顯增加.該實驗研究表明趨化因子受體CXCR4及其配體CXCL12在涎