1、　　目的：本室通過基因重組的方法克隆的vMIP—Ⅱ?qū)儆讦纶吇蜃蛹易?具有廣譜的趨化因子受體結(jié)合活性,可與cXCR4趨化因子受體結(jié)合,因此vMIP—Ⅱ必然影響到CXCR4的生物學特性。CXCR4主要分布在細胞表面,本實驗旨在闡明vMIP—Ⅱ?qū)κ荏wCXCR4內(nèi)化的效應作用,從而闡明其在抗HIV/AIDS中的作用機制。
　　方法：采用激光共聚焦顯微鏡技術定性CXCR4的內(nèi)化、流式細胞儀定量CXCR4的內(nèi)化和熒光分光光度計連續(xù)動態(tài)觀察v

2、MIP—Ⅱ?qū)毎麅?nèi)鈣離子濃度的影響。
　　結(jié)果：vMIP—Ⅱ能引起細胞表面受體CXCR4的內(nèi)化,濃度為100ng/ml時,vMIP—Ⅱ在給藥后的最初25分鐘能使細胞表面受體CXCR4內(nèi)化達到最大值,內(nèi)化率為75%,且能恒定在這一水平,vMIP—Ⅱ刺激時間的延長并不能再增加受體CXCR4的內(nèi)化率。在隨后沒有vMIP—Ⅱ的環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng),內(nèi)化到細胞內(nèi)的CXCR4并不能再循環(huán)到細胞表面。vMIP—Ⅱ能誘導的瞬間的高鈣離子內(nèi)流,鈣離子的內(nèi)

3、流速度穩(wěn)定在一較低的水平。在vMIP—Ⅱ與EDTA共培養(yǎng)時,EDTA鏊合掉細胞外的鈣離子,但我們?nèi)阅軝z測到細胞內(nèi)微弱的鈣離子,說明vMIP—Ⅱ可以誘導細胞內(nèi)鈣離子庫中鈣離子的釋放。
　　結(jié)論：作為抗HIV/AIDS的新型進入抑制劑,vMIP—Ⅱ不僅能引起靶細胞表面受體CXCR4的內(nèi)化,而且這種內(nèi)化的受體不再循環(huán)到細胞表面。CXCR4是HIV感染的必備的共受體,vMIP—Ⅱ不僅能和細胞表面CXCR4結(jié)合,封閉受體,而且還能引起CXC