1、南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文核因子κB在神經(jīng)干細(xì)胞增殖過程中的調(diào)控作用姓名：劉玉霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：汪泱20080601摘要3、觀察指標(biāo)及方法：采用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)方法及WesternBlotting方法檢測NSCsNFKB活化狀況(即P65在細(xì)胞中的分布變化)；采用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)方法檢測與細(xì)胞增殖相關(guān)的指標(biāo)(包括CyclinDl、Ki一67)及神經(jīng)球計(jì)數(shù)、神經(jīng)球體積測量方法觀察NSCs的增殖狀況。結(jié)

2、果：1、mNSCs的生長狀況及鑒定結(jié)果：mNSCs原代培養(yǎng)時(shí)，鏡下見培養(yǎng)2天后細(xì)胞分裂增殖逐漸形成呈懸浮生長的形態(tài)規(guī)則的神經(jīng)球，球周邊不斷有分裂增殖的細(xì)胞凸出。5、7天后球體積不斷增大，球中央的細(xì)胞因營養(yǎng)缺乏而逐漸變黑，予以傳代。免疫細(xì)胞熒光法鑒定神經(jīng)球中大部分為Nestin表達(dá)陽性細(xì)胞。2、NSCs的NFKB活化狀況：細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果顯示，TNFQ組可見明顯的p65活化由胞漿轉(zhuǎn)位至胞核；而PDTC組P65仍表達(dá)在胞漿，未見核轉(zhuǎn)位。

3、WesternBlotting結(jié)果顯示，TNF—c【組胞核NF—KB／p65蛋白含量顯著高于對(duì)照組，而PDTC組胞核p65蛋白含量極少。結(jié)果表明，TNF—Q能使mNSCsNF—KB活化。3、NSCs的增殖狀況：神經(jīng)球計(jì)數(shù)和神經(jīng)球體積測量結(jié)果顯示，TNFQ組和氯化鑭(25#mol／L)組神經(jīng)球數(shù)量分別為[(745626)個(gè)／瓶]和[(623228)個(gè)／瓶]，較對(duì)照組[(422835)個(gè)／瓶]明顯增多，PO05；神經(jīng)球體積分別為[(O820

4、16)106(肛m3)]和[(066012)x106(∥m3)]，較對(duì)照組[(026008)106(Ⅳm3)]明顯增大，PO05。細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果顯示，TNF—Q組和空白對(duì)照組中，CyclinDl陽性細(xì)胞率分別為(68642)％和(38837)％，明顯高于PDTC組的(24228)％，pO0l；Ki67陽性細(xì)胞率分別為(48236)％和(35247)％，明顯高于PDTC組的(18718)％，pO01。以上研究結(jié)果表明，TNF—a可使