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1、目的:對海藻酸納-軟骨細胞復(fù)合構(gòu)建的工程化軟骨進行組織形態(tài)學(xué)和超微結(jié)構(gòu)觀察,探討應(yīng)用工程性軟骨移植修復(fù)軟骨缺損的可行性.方法:取34周齡成年新西蘭兔雙膝關(guān)節(jié)軟骨,酶消化法得到高純度軟骨細胞,與可注射生物材料海藻酸鈉(Alginate)混合,種植密度為4×10<'6>/ml,通過硅膠模型制成圓形柱狀細胞盤(20ul/個),CaCl<,2>溶液中凝膠化10min,DMEM/F<,12>無血清培養(yǎng)基加20%FBS(fatal blood so
2、lution)于24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng).分別于2、4、6、8、10、12周取細胞盤,行HE、AB-PAS染色及免疫組化分析,測定盤中蛋白多糖含量,并作電鏡切片進行投射電鏡觀察.同時選用成年新西蘭兔28只,用電鉆在兔兩側(cè)股骨內(nèi)側(cè)髁中央造成直徑3.5mm、深3mm的全層軟骨缺損模型,隨機在缺損處植入體外培養(yǎng)4周的海藻酸鈉-軟骨細胞盤(實驗組)及無細胞的海藻酸鈉載體(對照組),分別于術(shù)后6、12、24、48周取材,觀察軟骨缺損修復(fù)情況.結(jié)論:海藻
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