1、背景與目的:該試驗(yàn)研究的目的在于尋找一種較好的、來源廣泛并且豐富的種子細(xì)胞,用于軟骨組織工程修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨的損傷.應(yīng)用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)作為種子細(xì)胞是軟骨組織工程修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷較理想的選擇.材料與方法:中國家兔15只,體重2.0~2.5kg,年齡不限,平均18月齡,雌雄不限.分別于雙側(cè)脛骨髁和雙側(cè)髂骨嵴抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物骨髓5~6ml,分離出單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)和擴(kuò)增,得到骨髓MSCs

2、懸濁液;實(shí)驗(yàn)組收集第2或第3代傳代細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),洗滌離心,在沉淀(即細(xì)胞)上加入由牛跟腱制備的Ⅰ型膠原凝膠液,混勻,使最終細(xì)胞密度為2×10<'6>個(gè)細(xì)胞/ml,將混合物在培養(yǎng)箱孵育10分鐘使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞-Ⅰ型膠原凝膠復(fù)合體膠化.細(xì)胞凝膠在2小時(shí)內(nèi)植入兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損內(nèi).同只實(shí)驗(yàn)兔雙膝關(guān)節(jié)股骨臏面鉆孔,鉆孔直徑4.0mm,深度3~4mm,至髓腔出血,造成全層軟骨及軟骨下骨質(zhì)全部缺損.右側(cè)為實(shí)驗(yàn)組,給予骨髓MSCs-膠原凝膠復(fù)合

3、體移植;左側(cè)為對照組,單純給予膠原凝膠移植.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)后放入鐵籠中自由活動(dòng).全部試驗(yàn)動(dòng)物于4、8、12周各取5例標(biāo)本進(jìn)行大體觀察和組織形態(tài)學(xué)觀察,并對修復(fù)軟骨組織的細(xì)胞形態(tài)、基質(zhì)染色、表面光滑度、軟骨厚度及與周圍組織整合情況進(jìn)行評(píng)分.結(jié)論:1.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)來源豐富、安全,是軟骨組織工程的理想種子細(xì)胞;2.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)移植修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損效果明顯優(yōu)于照組單純膠原凝膠移植;3.三大因素促使移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞