1、上海交通大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文前言9前言前言宮頸癌（cervicalcancer）是全世界范圍內(nèi)發(fā)病率僅次于乳腺癌的女性第二大常見的惡性腫瘤。據(jù)統(tǒng)計，全世界每年約有50余萬例新發(fā)宮頸癌，其中，80%的宮頸癌發(fā)生于發(fā)展中國家而每年因?qū)m頸癌死亡者高達27萬例[1]。近年來，隨著生活習(xí)慣以及性觀念的改變，宮頸癌發(fā)病年齡呈年輕化趨勢，45歲以下的年輕宮頸癌患者成為患病主體[2]，嚴(yán)重威脅著婦女的身心健康和生命。目前高危型人乳頭瘤病毒（human

2、papiltomaviruHPV）感染是公認(rèn)的宮頸癌及癌前病變發(fā)生的主要病因[3]，流行病學(xué)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)99.7%的宮頸病變組織中均可檢測到HPV[4]。研究稱，性生活活躍期婦女感染HPV的終生累積率為50%80%[3]，但臨床上感染HPV病毒的女性并非全部發(fā)展為宮頸癌，大部分HPV感染是一種良性臨床行為并能被宿主的免疫系統(tǒng)所清除，僅極少部分持續(xù)性高危型HPV感染者可進展為宮頸癌[3]，究其原因，除與HPV感染類型及毒力強弱有關(guān)之外，宿

3、主因素如遺傳易感性、免疫監(jiān)視系統(tǒng)的狀態(tài)等可能在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展中起了重要作用。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94（glucoseregulatedprotein94GRP94），又稱熱休克蛋白gp96（heatshockproteingp96HSPgp96），分子量9496KDa，屬HSP90家族，是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中含量最豐富的糖蛋白[5]。除可作為分子伴侶參與蛋白質(zhì)的折疊、組裝、轉(zhuǎn)運以及分泌外，GRP94還具有抗凋亡作用和免疫調(diào)節(jié)功能[6]。既往研究表明，腫

4、瘤細(xì)胞中過表達的GRP94具有抑癌和促癌兩個方面的作用。抑癌作用表現(xiàn)為：一方面，GRP94可以與腫瘤源性的抗原肽形成復(fù)合物，細(xì)胞裂解后，GRP94抗原肽復(fù)合物被專業(yè)抗原提呈細(xì)胞（antigenpresentingcellsAPCs）捕獲，經(jīng)CD91提呈至主要組織相容性復(fù)合物（majhistocompatibilitycomplexMHC）Ⅰ類分子，進而提呈至CD8T細(xì)胞激活細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞（cytotoxicTlymphocyteCTL

5、），啟動適應(yīng)性免疫應(yīng)答，從而發(fā)揮抗病毒及抑癌作用[6]；另一方面，GRP94可結(jié)合于APCs上的清道夫受體和Toll樣受體，激活NFκB信號通路，誘導(dǎo)細(xì)胞因子的分泌，進而激活自然殺傷細(xì)胞（naturalkillercellNKcells），激活固有免疫反應(yīng)，從而殺傷腫瘤細(xì)胞[67]。促癌作用表現(xiàn)為：一方面，上海交通大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文前言11CD8CTL是機體抗病毒、抗腫瘤最主要的效應(yīng)細(xì)胞[17]，主要通過兩種機制發(fā)揮細(xì)胞毒作用[18

6、]：一是通過分泌穿孔素（perfin）和顆粒酶（granzyme）等物質(zhì)直接殺傷靶細(xì)胞；二是通過FasFasL途徑誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡。CTL在殺傷靶細(xì)胞的過程中自身不受傷害，可連續(xù)殺傷多個靶細(xì)胞（圖2）。CTL表達的異?？蓪?dǎo)致患者免疫功能的失常。圖2CTL殺傷靶細(xì)胞的過程本研究選取99例石蠟包埋宮頸病變組織和12例新鮮宮頸病變組織標(biāo)本，采用免疫組化SP法以及westernblot技術(shù)檢測宮頸病變組織中GRP94蛋白和CD8分子的表達情況，結(jié)