1、[目的]:骨髓增生異常綜合征(MDS)是一組以血細胞質、量異常和高風險發(fā)展成為急性白血病為特征的惡性克隆性造血干細胞病.病人常常表現為髓內異常增生,但外周血細胞減少.這種現象近來被歸結于造血細胞的過度凋亡,而MDS向白血病的進展則可能是由于獲得性的基因變異抑制細胞凋亡,從而使惡性克隆細胞得以存活.因此,凋亡目前已成為研究MDS發(fā)病機制的熱點,與凋亡有關的基因也引起人們的廣泛關注.[方法]:1應用流式細胞儀技術及透射電鏡研究HHT誘導人骨

2、髓增生異常綜合征細胞株MUTZ-1,人急性紅白血病細胞K562,人淋巴瘤細胞株Jurkat,人骨髓瘤細胞株RMPI及人急性粒細胞白血病細胞株HL60細胞凋亡及形態(tài),MUTZ-1細胞周期的變化.2半定量逆轉錄酶-多聚酶鏈式反應檢測MDS患者骨髓單個核細胞、上述細胞株及HHT作用MUTZ-1細胞后凋亡蛋白抑制因子survivin、XIAP及凋亡調節(jié)基因Bcl-2、Bax的表達.3應用反義轉染技術研究高三尖杉酯堿(HHT)和survivin反

3、義寡聚脫氧核苷酸(AS-ODN)對MUTZ-1細胞的作用及其機制.[小結]:1HHT能誘導MUTZ-1、K562、Jurkat、RPMI、HL60凋亡,相同濃度HHT作用12h后各細胞株凋亡率不同,其中K562凋亡率最低,Jurka與HL60凋亡率最高;不同濃度HHT作用6、12、24h后,MUTZ-1細胞凋亡呈時間和濃度依賴.2各細胞株均有不同水平survivin mRNA的表達,其表達水平不同,其中K562表達最高,Jurkat與H

4、L60表達最低.細胞株survivin mRNA的表達水平與HHT誘導的凋亡率呈負相關(r=0.980,p=0.003).3HHT作用MUTZ-1細胞后,抗凋亡基因survivin mRNA下調,而促凋亡基因Bax mRNA和抗凋亡基因XIAP Bcl-2mRNA表達無明顯改變.4HHT或Survivin AS-ODN作用MUTZ-1細胞后,細胞G1期明顯減少,而S期及G2期增多,細胞被阻滯在G2期.5Survivin AS-ODN能誘

5、導MUTZ-1細胞凋亡,下調抗凋亡基因survivin mRNA表達,并可明顯提高MUTZ-1細胞對HHT的敏感性.6Survivin mRNA在MDS患者中陽性率明顯高于正常對照(P<0.01),而且survivin mRNA在MDS各階段的陽性率也不同,隨著MDS的進展,survivin mRNA的表達率也隨之增高,表明在MDS的進展過程中survivin起重要作用.MDS患者及正常對照均表達XIAP、Bcl-2及Bax,但表達水平