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文檔簡介
1、本研究通過對扁豆不同資源在干旱脅迫條件下的生理生化反應進行研究,發(fā)現(xiàn)扁豆資源眉豆2012及南匯23在受到相同程度的干旱脅迫條件下,從根系鮮重、相對含水量、蒸騰效率、與抗旱相關的可溶性小分子(脯氨酸、可溶性糖)等生理指標及超氧化物歧化酶、過氧化物酶、過氧化氫酶活性等生化指標表現(xiàn)方面,眉豆2012干旱脅迫的抗性顯著高于南匯23,為抗旱型品種。
通過正交設計實驗對SRAP反應體系進行優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)dNTP及Mg2+濃度對PCR反應具有顯
2、著影響,確定SRAP-PCR在扁豆中的最優(yōu)體系及反應條件。通過信息學手段新開發(fā)大豆中的EST-SSR標記,并驗證其在扁豆中的通用性。發(fā)現(xiàn)大豆中的SSR在扁豆中的通用性為100%,且具有多態(tài)性。利用SRAP及SSR標記,以眉豆2012及南匯23雜交構建的F6代群體共114個單株為基礎,進行遺傳連鎖圖譜的構建。圖譜共包含104個多態(tài)性位點,位點分布于14個連鎖群上,圖譜覆蓋距離1735.9cM。同時利用構建的圖譜對扁豆根系鮮重、根系干重及最
3、長根長等3個與干旱抗性相關的農(nóng)藝性狀進行QTL定位,共檢測到11個QTL位點,分別位于7個不同的連鎖群上。
利用扁豆抗旱資源眉豆2012的苗期根系,構建干旱脅迫下的正向及反向抑制性消減雜交文庫。通過文庫篩選共得到表達水平存在1.5倍以上差異的序列1,287條,這些序列與大豆中的相關序列存在80.6%的同源性。同時分析發(fā)現(xiàn)這些基因涉及到苯丙氨酸代謝途徑、黃酮合成途徑、脯氨酸代謝途徑等與逆境脅迫相關的途徑。同時亦發(fā)現(xiàn)與抗旱生理指標
4、變化相關的氨基酸、維生素、可溶性糖、激素及相關酶類合成及代謝途徑中的酶編碼基因序列。對正向文庫中的序列表達分析發(fā)現(xiàn),隨著干旱程度的加深,文庫中的基因表達上調可分為三個主要的類型。
對文庫篩選得到的扁豆中與抗旱密切相關的轉錄因子LpMYB1-like進行克隆,并通過RACE技術獲得該基因全序列。分析發(fā)現(xiàn)該基因全長1,093bp,為典型的R2R3-MYB轉錄因子結構,且在C端具有反式激活活性。該基因在不同組織中對干旱脅迫響應存在差
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