1、光周期現(xiàn)象是植物通過對晝夜相對長度變化的感應來控制開花的一種植物生理現(xiàn)象。光周期對植物生育期、適應性以及產量均具有重要影響。CO(CONSTANS)是植物光周期開花調控途徑中的一個重要基因，近年來在模式植物擬南芥、水稻等植物中CO家族的研究己取得很大的進展，但作為主要糧食作物的小麥，其CO基因家族的研究則相對滯后。因此，克隆和分離小麥CO家族基因并對其結構和功能進行研究有著重要的理論和實踐意義。
　　 本實驗利用同源克隆和cDN

2、A文庫篩選相結合的方法克隆到三個小麥CONSTANS-like基因家族基因：TaCOLX、TaCOL4和TaCOL5；通過序列分析研究了它們的結構、序列同源性和序列多態(tài)性；通過農桿菌介導法轉化水稻，對TaCOLX、TaCOL4基因的功能進行研究。主要研究進展如下：
　　 1.利用同源克隆和cDNA文庫篩選相結合的方法，克隆得到三個小麥CONSTANS-like基因家族基因：TaCOLX、TaCOL4和TaCOL5。TaCOLX基

3、因序列含有兩個外顯子和一個內含子，CDS序列中960bp的開放閱讀框編碼320個氨基酸，具有兩個B-box結構域和一個CCT結構域；TaCOL4基因序列含有一個外顯子，CDS序列中1266bp的開放閱讀框編碼422個氨基酸，具有一個B-box結構域和一個CCT結構域；TaCOL5基因的CDS序列中978bp的開放閱讀框編碼326個氨基酸，具有一個B-box結構域和一個CCT結構域；B-box和CCT結構域是有CONSTANS-like家

4、族基因典型的結構域，表明它們都編碼一個CONSTANS-like蛋白。
　　 2.設計TaCOLX和TaCOL4的A、B和D基因組的非特異引物，對普通小麥中國春進行擴增。分離得到TaCOLX的三個同源基因，分別命名為：TaCOLX-A、TaCOLX-B、TaCOLX-D，它們的核苷酸序列相似度大于97.1％；同樣分離得到TaCOL4的三個同源基因，分別命名為：TaCOL4-A、TaCOL4-B、TaCOL4-D，它們的氨基酸序列

5、相似度大于97.6％。
　　 3.利用11份小麥親本材料對TaCOLX和TaCOL4-D進行序列多態(tài)性分析，發(fā)現(xiàn)在這些材料中只有TaCOLX-A在5’UTR區(qū)有一處9bp的缺失；TaCOL4-D在編碼區(qū)有2個SNP位點，在5’UTR端有15個SNP位點。
　　 4.利用中國春缺四體材料對TaCOLX-D和TaCOL4-D進行染色體定位，將TaCOLX-D定位在小麥2D染色體上，將TaCOL4-D定位于小麥7D染色體上；根

6、據(jù)TaCOL4-D在M6和Opata85間的一個等位基因單堿基差異設計標記，并利用M6×Opata85作圖群體，將TaCOL4-D定位在小麥7D染色體標記Xfba8和Xgwm111之間，遺傳距離分別為4.0cM和1.7cM。
　　 5.分別構建了TaCOLX和TaCOL4基因的載體并轉化水稻，分別得到兩基因的T0代轉基因水稻，且表現(xiàn)型都為延遲水稻抽穗期。對它們的T1代轉基因水稻鑒定發(fā)現(xiàn)抽穗期晚的表現(xiàn)型與基因型共分離，故TaCOL