板藍(lán)根根腐病病原鑒定及拮抗微生物的篩選.pdf_第1頁(yè)
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1、近年來(lái),板藍(lán)根根腐病在一些產(chǎn)區(qū)發(fā)生逐年加重,成為板藍(lán)根生產(chǎn)的限制性障礙。本文以板藍(lán)根根腐病為研究對(duì)象,進(jìn)行了病原菌的分離、致病性測(cè)定、種類鑒定、生物學(xué)特性研究以及拮抗微生物的篩選試驗(yàn)。
   分別于2005年7月和2006年7月,從河北省唐山地區(qū)采集板藍(lán)根根腐病樣品108份,共分離獲得172株分離物,經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定屬于2屬3個(gè)種:茄腐鐮刀菌(Fusarium solani)、尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)和禾谷

2、絲核菌(Rhizoctonia cereadis)。茄腐鐮刀菌分離頻率最高(48.8%),其次為尖孢鐮刀菌(44.2%),禾谷絲核菌分離頻率最低(7%)。從每種菌中選取代表菌株,分別是:茄腐鐮刀菌菌株P(guān)4和P5,尖孢鐮刀菌菌株P(guān)1和禾谷絲核菌菌株P(guān)2。經(jīng)致病性測(cè)試,結(jié)果表明:菌株P(guān)4、P5致病性最強(qiáng),發(fā)病率均為100%,病情指數(shù)在55以上;P1致病性較弱,發(fā)病率為89%,病情指數(shù)為36;P2的致病性最弱,發(fā)病率為67%,病情指數(shù)為31。

3、
   利用ITS序列分析從分子水平對(duì)菌株P(guān)1、P2、P4和P5進(jìn)行了種類鑒定。結(jié)果表明:菌株P(guān)1與GenBank中尖孢鐮刀菌(DQ459007)的同源性為100%,P2與禾谷絲核菌(AJ242887)同源性為100%,P4與茄腐鐮刀菌(AY310442)的同源性為99%,P5與茄腐鐮刀菌(AJ608989)的同源性為100%。這證明了形態(tài)學(xué)鑒定的結(jié)果是正確的,也進(jìn)一步說(shuō)明了ITS序列對(duì)于真菌種間鑒定是可行的。在研究中還發(fā)現(xiàn)利用

4、ITS序列分析病菌種內(nèi)或種以下水平?jīng)]有發(fā)現(xiàn)差異或差異不明顯,因此ITS序列分析不能作為種內(nèi)或種以下水平鑒定和分類的依據(jù)。
   通過(guò)對(duì)Pl、P2、P4和P5四個(gè)菌株在不同溫度、pH值、碳源、氮源、相對(duì)濕度條件下菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢量、孢子萌發(fā)以及致死溫度的研究。結(jié)果表明:菌株P(guān)l在PDA培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢量和孢子萌發(fā)最適溫度均為25℃,菌絲生長(zhǎng)和分生孢子萌發(fā)最適pH值均為6,產(chǎn)孢量最適pH值為5,最適碳源為蔗糖,最適氮源為硝酸鈉,

5、在相對(duì)濕度低于90%孢子不萌發(fā),分生孢子致死溫度為55℃。菌株P(guān)2在PDA培養(yǎng)基上最適生長(zhǎng)溫度為30℃,在pH值為6時(shí)菌絲生長(zhǎng)速度最快;最適碳源為淀粉,最適氮源為硝酸鈉。菌株P(guān)4和P5在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng),菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量最適溫度均為30℃,孢子萌發(fā)最適溫度為25℃,菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢量和分生孢子萌發(fā)最適pH值均為7,最適碳源為乳糖,最適氮源為硝酸鈉,在相對(duì)濕度低于90%時(shí)孢子不萌發(fā),分生孢子致死溫度為50℃。
   本研究以板藍(lán)根

6、根腐病菌(P4菌株)為靶標(biāo)菌,共篩選得到了73株拮抗放線菌和38株拮抗細(xì)菌。其中,菌株B4228和A4075對(duì)靶標(biāo)病原菌的抑制作用較強(qiáng)。對(duì)B4228和A4075兩個(gè)菌株進(jìn)行抑菌譜測(cè)定的結(jié)果表明,兩個(gè)菌株對(duì)番茄早疫病菌(Alternaria solani(Ellis et Martin)Jones et Grout.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、棉花枯萎病菌(Veticillium dahliae)、棉花立枯病菌(

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