1、血栓栓塞性疾?。╰hrombotic disease，TD）發(fā)病率、致殘率、致死率皆高，已成為嚴重危害人類健康的疾病之一。藥物溶栓是目前臨床應用最廣泛、最有效的治療手段。迄今為止，溶栓劑已發(fā)展了三代，但依然存在一定的缺陷，仍有待開發(fā)安全有效的新型溶栓劑。本研究旨在從微生物中開發(fā)出一種新型溶栓劑。
　　 從自然界分離的一株胞外產纖溶酶的芽孢桿菌B-60菌株，通過對它的形態(tài)、生理生化特征進行研究，對其16S rDNA序列進行測定與比

2、對，發(fā)現(xiàn)芽孢桿菌B-60菌株與假蕈狀芽孢桿菌的形態(tài)、生理生化特征相符，與其16S rDNA序列也有高達99.38％的同源性。根據(jù)多相分類原則，認為芽孢桿菌B-60菌株為假蕈狀芽孢桿菌（Bacillus pseudomycoides）。
　　 采用單因子試驗和正交試驗對產纖溶酶的假蕈狀芽孢桿菌B-60的發(fā)酵條件進行優(yōu)化。產纖溶酶最佳條件為：蔗糖15 g/L，豆餅粉15 g/L，MnSO4·H2O3.4 g/L，CaCl23.3g/

3、L，K2HPO4·3H2O0.8 g/L，KH2PO40.2g/L，MgSO4·7H2O7.4 g/L；培養(yǎng)溫度32℃，培養(yǎng)基初始pH6.5～7.0，裝液量250 mL的三角瓶50 mL，接種量2％～6％，發(fā)酵時間56 h左右。Ca2+、Mg2+、K+、Mn2+對酶活有促進作用，Zn2+、Fe2+對酶活有強烈抑制作用。優(yōu)化后，點樣10μL發(fā)酵液溶圈直徑為19.5mm，溶圈面積為298 m㎡。
　　 利用硫酸銨沉淀和陰離子交換色譜

4、從假蕈狀芽孢桿菌B-60菌株中分離純化出具有纖溶活性的單體蛋白單一組分（BpFE），并對BpFE性質進行分析。BpFE表觀分子量為34 kD。它在4℃～50℃活性較穩(wěn)定，50℃以上活性急劇下降；作用最適pH值為pH5～6，在pH5～10活性較穩(wěn)定，在pH3.0，活性幾乎喪失；金屬離子Ca2+，Mg2+，Mn2+對酶活有輕微促進作用，Cu2+則強烈抑制酶活。苯甲基磺酰氟（PMSF）完全抑制它的活性。BpFE經胰蛋白酶和胃蛋白酶降解后，活性