金緣連翹的變異來源、組織培養(yǎng)技術(shù)及其越冬性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文通過應用PCR-RFLP分析、組織培養(yǎng)、物候觀測、生長發(fā)育調(diào)查和生理指標測定等方法和手段,對東北連翹、金鐘連翹和金緣連翹進行了定性和定量的比較分析,旨在探索金緣連翹的變異來源、組培快繁和越冬性,為金緣連翹的推廣應用提供理論依據(jù)。 應用PCR-RFLP技術(shù)對東北連翹、金鐘連翹和金緣連翹三種材料的細胞核基因組DNA進行遺傳變異分析。通用引物擴增出片段,然后用10種限制性內(nèi)切酶對其進行酶切,共檢測到240條DNA片段,其中210條

2、具有多態(tài)性,占87.5%。所有的90種引物/酶組合中,得到清晰穩(wěn)定的50種引物/酶組合,其中在14份材料中有32種引物/酶組合(占60.4%)能檢測到多態(tài)性。結(jié)果表明:金緣連翹、金鐘連翹和東北連翹細胞核基因組間存在明顯遺傳相似性和差異性;金緣連翹與金鐘連翹有較近的親緣關(guān)系,金緣連翹與東北連翹表現(xiàn)出較遠的親緣關(guān)系,表明金緣連翹是金鐘連翹的變異。 以金緣連翹莖段為外植體,探索金緣連翹組織培養(yǎng)快速繁殖各階段的最佳培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)程序。

3、結(jié)果表明:金緣連翹初代培養(yǎng)途徑最適培養(yǎng)基配方為MS+BA3.0 mg·L<'-1>+NAA0.08mg·L<'-1>+IBA0.08mg·L<'-1>.幼苗生長快;愈傷組織途徑增殖最佳培養(yǎng)基為MS+BA2.0mg·L<'-1>+NAA0.08mg·L<'-1>+IBA0.08w mg·L<'-1>較好;生根階段的最適培養(yǎng)基為MS+BA2.0mg·L<'-1>+NAA0.04mg·L<'-1>+IBA0.04mg·L<'-1>,生根率可達

4、80%以上,根系粗壯,生長迅速。 通過低溫脅迫處理,金緣連翹與東北連翹、金鐘連翹的幼苗的生理生化指標都有較大的變化,而且因種類的不同,而呈現(xiàn)不同的幅度變化。脯氨酸含量、可溶性糖含量、丙二醛含量隨低溫處理時間的增加而增大。這三種連翹葉片中的脯氨酸含量都表現(xiàn)為增加,但有些在低溫脅迫一段時間后,脯氨酸含量達到最高點,然后隨脅迫時間增加而降低。依據(jù)葉片在低溫脅迫條件下的生理生化指標的變化將三種連翹抗寒性按由大到小的排序排列為:東北連翹≥

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