1、眾所周知，人體細(xì)胞內(nèi)活性氧與人的衰老有密切的關(guān)系。細(xì)胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生和清除始終處于一種動(dòng)態(tài)平衡。許多研究表明活性氧對(duì)細(xì)胞有明顯的毒害作用，它們能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類(lèi)發(fā)生作用而引起蛋白質(zhì)失活和降解、DNA鏈斷裂和膜脂過(guò)氧化等現(xiàn)象，從而導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞。目前研究用于抗氧化來(lái)清除活性氧的保健產(chǎn)品主要是非酶類(lèi)口服食品與酶類(lèi)化妝品。酶類(lèi)的化妝品主要以添加超氧化物歧化酶(SOD)為主，但僅僅在皮膚美容方面提示有抗衰老作用，而未真正有效地將“

2、抗衰老”延伸到機(jī)體所有組織器官的功能性衰退防護(hù)上，因而，開(kāi)發(fā)研究口服含有SOD活性的食品食近年來(lái)抗氧化產(chǎn)品研發(fā)的熱門(mén)之一。 目前國(guó)內(nèi)SOD產(chǎn)品大都從牛、馬、豬、雞、狗等動(dòng)物血中提取，存在有血制品帶來(lái)的病毒、細(xì)菌感染的危險(xiǎn)，同時(shí)由于動(dòng)物飼養(yǎng)過(guò)程中的污染殘留使動(dòng)物提取SOD具有一定安全隱患。國(guó)際上最近掀起的植物SOD熱，以大蒜、韭菜、玉米淀粉等為原料提取制備SOD，分別在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中取得了與動(dòng)物來(lái)源的SOD相同的營(yíng)養(yǎng)功效，預(yù)示了開(kāi)發(fā)植

3、物SOD的應(yīng)用前景。 木瓜(Chaenomelessinesis)是我國(guó)衛(wèi)生部公布的藥食兩用植物。木瓜中除了含有大量的氨基酸、糖類(lèi)物質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)等成分，具有一定的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充功能外，文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)木瓜具有以下藥理功能：抗炎、鎮(zhèn)痛、保肝、抗腫瘤、抗菌功能等，這可能與木瓜含有豐富的抗氧化物質(zhì)和植物活性成分有關(guān)。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)室前期初步研究，發(fā)現(xiàn)木瓜提取物中不但含有很高的多酚類(lèi)物質(zhì)，還含有較高的超氧化物歧化酶活性。 自20紀(jì)初環(huán)糊

4、精(CDs)被分離得到以來(lái)，人們對(duì)其研究不斷取得新的進(jìn)展。不僅提高了CDs的產(chǎn)量，而且對(duì)天然CDs進(jìn)行了結(jié)構(gòu)改造，合成了一系列具有獨(dú)特性能的CDs衍生物。目前，CDs除了在醫(yī)藥工業(yè)方面有廣泛的用途外，還在食品、化裝品、環(huán)境保護(hù)、色譜分析等方面也得到了應(yīng)用。一些藥物制成CDs包合物后，其溶解度、生物利用度、化學(xué)穩(wěn)定性、不良嗅昧、刺激性等某一方面可能有明顯的改善。近年來(lái)，環(huán)糊精在食品工業(yè)中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，特別在保護(hù)多肽、蛋白質(zhì)、酶類(lèi)等活性

5、物質(zhì)的生物活性、提高穩(wěn)定性、延長(zhǎng)半衰期、延緩釋放方面起到巨大的作用。運(yùn)用環(huán)糊精包合技術(shù)保持產(chǎn)品生物學(xué)功效、提高穩(wěn)定性的特性，開(kāi)發(fā)木瓜SOD復(fù)合抗氧化物可以為木瓜產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)開(kāi)辟一條新的途徑。 本研究首先對(duì)木瓜中的主要抗氧化物進(jìn)行了分析測(cè)定，并著重采用分離純化技術(shù)對(duì)其中的SOD進(jìn)行了定性研究；然后采用生物酶技術(shù)、環(huán)糊精包合技術(shù)及噴霧制粒技術(shù)將木瓜中的抗氧化組分轉(zhuǎn)移到環(huán)糊精載體上，制備為木瓜SOD抗氧化顆粒(SODantioxidan

6、tparticlesofChaenomelesSinesis，CSAP)，提高了SOD及其他抗氧化物的提取率及加工儲(chǔ)藏穩(wěn)定性；最后利用抗氧化功能評(píng)價(jià)動(dòng)物模型研究了木瓜復(fù)合抗氧化顆粒的生物學(xué)抗氧化效應(yīng)。 本研究主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 1.木瓜中的SOD總活力為4.32×104U/100g，其亞型主要為cu,ZnSOD，其活力為總SOD活力的95％，為4.10x104U/100g，與含SOD的常見(jiàn)市售果蔬相比SOD活力大小依次為

7、大蒜＞木瓜＞蘋(píng)果＞廣柑。 2.木瓜中的其他抗氧化物質(zhì)主要還含有大量的多酚和維生素C，汁液中含量分別為7.8mg/ml和0.65mg/ml。多酚中單寧占50％，黃酮類(lèi)占16％，其他酚類(lèi)約占34％。 3.對(duì)酶解木瓜上清液的SOD進(jìn)行分離純化，使SOD比活力由190.1U/mg提高到6159U/mg。木瓜SOD的分子量在25KD至31KD之間，為28KD。 4.木瓜：水=1:2的比例能夠滿足超微磨漿順利進(jìn)行，又有利于后

8、期SOD的顆?；庸?。單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化得到酶解提取木瓜SOD及其他抗氧化成分的最佳工藝為：酶解液pH值為3，纖維素.果膠復(fù)合酶添加量為1.2％，酶解溫度為40℃，酶解時(shí)間為60分鐘。使木瓜出汁率提高了近100％，SOD總活力提高近10.65％。 5.β-環(huán)糊精和γ-環(huán)糊精的包合常數(shù)在一定濃度范圍內(nèi)隨濃度的增高而增大，1.5％β-環(huán)糊精的包合常數(shù)為0.79×103，3％的γ-環(huán)糊精包合常數(shù)為1.8×103，因此選擇γ-環(huán)糊

9、精作為包合物較為適宜；采用3％的γ-環(huán)糊精包合木瓜SOD，經(jīng)加熱(50℃，45分鐘)處理、酸處理(pH=1.7，15分鐘)和人工胃液(15分鐘)處理后SOD活性殘留率分別為40％、52％和34％。 6.正交實(shí)驗(yàn)獲得的噴霧制粒最優(yōu)工藝參數(shù)為：料液比為2:1，噴霧制粒是物料溫度45℃。木瓜SOD固體顆粒的SOD活性保留率為67.8％，每100gCSAP產(chǎn)品中含SOD活性為2.4×105U。 7.木瓜在凍藏4個(gè)月后，SOD活性