用實時定量PCR研究人類皰疹病毒5型和6型與口腔扁平苔蘚發(fā)病的關系.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的與方法:人類皰疹病毒與口腔扁平苔蘚(OLP)的關系一直沒有定論。由于以前的研究發(fā)現(xiàn),在活檢組織樣本中HHV-6和HCMV(二者均屬人類皰疹病毒的β亞科)的檢出率比其它皰疹病毒相對高,再加上OLP在臨床上具有反復發(fā)作的特點,因此一些研究者猜想,人類皰疹病毒p亞科,特別是HHV-6和HCMV,或許與OLP的發(fā)病有關系,但缺乏統(tǒng)計學的支持。以前的這方面研究主要是采用傳統(tǒng)的定性PCR的方法,雖然定性PCR直到現(xiàn)在仍被用于臨床樣本的檢測,但它

2、并不能準確地反映出陽性樣本中病毒的活化和復制狀況,這是定性PCR的局限性;另外,以前有關的研究在OLP樣本的選擇方面也存在著某些缺陷。為了進一步揭示HHV-6和HCMV與OLP的關系,本研究在以上兩方面作了改進:①我們選用了實時定量(teal-time)PCR的檢測技術的Cycleave熒光法,其探針是由RNA和DNA雜交而成并在檢測時還結合使用RNase-H,這種檢測技術除了在底物擴增效率和檢測準確性方面優(yōu)于其它的定量:PCR外,還具

3、有高度的靈敏性;②我們有針對性地選擇可能與病毒有關的病例,16例OLP患者的取樣范圍包括外周血白細胞、血漿、唾液、病損區(qū)脫落細胞、非病損區(qū)脫落細胞以及活檢組織,并使用了10例健康人作組間對照,這樣不但可以充分地利用定量PCR技術的優(yōu)勢,而且還使我們的研究更加符合統(tǒng)計學的要求。 結果:在14名(14/16,87.5﹪)OLP患者的27個(27/85,31.76﹪)樣本中以及在3名(3.10,30﹪)健康對照者的5個(5/40,12

4、.5﹪)樣本中檢出了HCMV-DNA。在85個OLP樣本中,27個樣本HCMV陽性,其中6個樣本為HCMV和HHV-6共同陽性,其余的1例HHV-6陽性在其它樣本中單獨檢出;在40個健康對照的樣本中,5個樣本HCMV陽性,其中含有1例HHV-6陽性的樣本,HHV-6僅檢出1例。OLP組的樣本各自攜毒率依次為白細胞50﹪(8/16)、唾液25﹪(4/16)、活檢組織80﹪(4/5)、病損區(qū)脫落細胞50﹪(8/16)、非病損區(qū)脫落細胞18.

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