1、研究目的 觀察增齡對大鼠骨髓MSC s的數(shù)量、以及外周血和股骨皮質(zhì)中BMP2含量的影響,分析MSCs數(shù)量和BMP2含量變化與老年人骨量丟失及老年性骨質(zhì)疏松間的相互關系.比較BMP2基因修飾的不同年齡來源的MSC s的BMP2分泌能力及成骨分化能力.在此基礎上,應用BMP2基因修飾的自體MSCs與TCP載體復合后修復老年大鼠股骨節(jié)段性骨缺損.研究方法1取三種年齡層次的Wi star大鼠各6只,幼年(4齡周)、成年(9-12月齡)、老年(2

2、4月齡),計算其骨髓MSCs數(shù)量,應用ELISA技術定量檢測其外周血中及股骨皮質(zhì)骨中BMP2的含量.2通過Adv-hBMP2基因不同年齡來源的MSC s,觀察它們之間成骨分化能力的差別.4周齡、9月齡及24月齡大鼠的MSCs在體外培養(yǎng)、擴增、Adv-hBMP2基因轉(zhuǎn)染后,定量檢測hBMP2的表達和成骨細胞型標志蛋白如堿性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型膠原(COLL I)、骨橋素(OPN)、骨涎蛋白的表達(BSP)的表達.同時檢測了MSC s/T

3、CP復合物在裸鼠體內(nèi)成骨能力的差別.3老年大鼠MSCs經(jīng)體外分離、培養(yǎng)、Adv-BMP2基因(試驗組)或Adv-gal基因(對照組)轉(zhuǎn)染,檢測BMP2的表達及成骨細胞顯型蛋白如ALP、COLL I、OPN、BSP的表達.與TCP復合后,植入體內(nèi)修復老年大鼠自體股骨節(jié)段性骨缺損,通過放射學及組織學進行檢測.結論1骨髓中MSC s的數(shù)量、外周血及皮質(zhì)骨中BMP2的含量均隨增齡而減少,可能是老年骨量丟失與老年性骨質(zhì)疏松發(fā)病的重要原因.2經(jīng)BM