1、目的：
　　骨缺損的再生主要依靠骨自身的修復(fù)能力。骨組織雖然具有強(qiáng)大的再生能力，但因各種原因?qū)е碌拇竺娣e骨缺損仍是臨床中比較棘手的問題。在組織工程中，生長(zhǎng)因子是誘導(dǎo)成骨能力的重要媒介。骨組織工程利用生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)細(xì)胞成骨，并聯(lián)合支架材料用于骨缺損，已經(jīng)被臨床和科研廣泛采用。目前在組織工程中應(yīng)用較為廣泛的生長(zhǎng)因子主要有骨形態(tài)發(fā)生蛋白、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子等。但它們都存在著相應(yīng)的缺點(diǎn)和弊端，難以完美滿足骨組織過工程發(fā)展的需要。

2、而我們通過文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)目前有多項(xiàng)研究報(bào)道SHP-2基因可以有效地促進(jìn)破骨細(xì)胞分化，并參與成骨分化細(xì)胞通路，且該基因敲除的小鼠出現(xiàn)了骨發(fā)育遲緩障礙，因此我們預(yù)測(cè)該基因可以促進(jìn)成骨細(xì)胞分化和骨生成，并通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)這一假設(shè)
　　方法：
　　使用PCR方法擴(kuò)增SHP-2基因，構(gòu)建SHP-2基因慢病毒表達(dá)載體，并轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)設(shè)計(jì)4個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別為：?jiǎn)渭傿MSCs組，經(jīng)成骨細(xì)胞誘導(dǎo)液誘導(dǎo)的BMSCs組，經(jīng)SHP

3、-2基因修飾的BMSCs組和成骨細(xì)胞誘導(dǎo)液聯(lián)合SHP-2基因修飾的BMSCs組，四組細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，并在不同的培養(yǎng)階段利用PCR、Western檢測(cè)定各組成骨標(biāo)志物的表達(dá)，堿性磷酸酶和茜素紅染色檢測(cè)成骨活性。制作大鼠顱骨缺損模型,將4組細(xì)胞/磷酸三鈣復(fù)合物植入到顱骨缺損處，取材后將組織進(jìn)行放射學(xué)檢查、HE、Masson染色和免疫組織化學(xué)染色鑒定骨修復(fù)的效果。
　　結(jié)果：
　　SHP-2慢病毒表達(dá)載體轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

4、后持續(xù)有效的增加了SHP-2在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。體外實(shí)驗(yàn)中，SHP-2基因轉(zhuǎn)染BMSCs組和成骨細(xì)胞誘導(dǎo)液聯(lián)合SHP-2基因修飾的BMSCs組成骨標(biāo)志物較其他組表達(dá)為高。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，植入后8周大體組織學(xué)和影像學(xué)檢查表明,SHP-2基因轉(zhuǎn)染組和SHP-2基因轉(zhuǎn)染聯(lián)合成骨細(xì)胞誘導(dǎo)液誘導(dǎo)組在成骨標(biāo)志物表達(dá)和促進(jìn)骨組織生成方面多于其他組。
　　結(jié)論：
　　SHP-2高表達(dá)可促進(jìn)大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞在體外向成骨細(xì)胞分化。SHP-2基因轉(zhuǎn)染