1、 目的：細(xì)胞周期調(diào)控基因與蛋白的改變?cè)谌四[瘤的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮著相當(dāng)重要和關(guān)鍵的作用,p27 作為細(xì)胞中細(xì)胞周期依賴性激酶抑制因子(cyelindependent kinase inhibitor,CKI,CKI包括KIP家族和INK4家族) 里KIP家族的重要成員之一,具有抑制多種cyclin/CDK復(fù)合物的活性發(fā)揮的作用,存在于細(xì)胞周期的進(jìn)程中起著負(fù)性調(diào)控的重要作用,同時(shí)p27 還具有在細(xì)胞周期中介導(dǎo)抑制性細(xì)胞發(fā)生相應(yīng)分子反應(yīng),

2、并進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞的分化作用,進(jìn)而增加細(xì)胞之間相互產(chǎn)生的粘附作用。在細(xì)胞中,細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent kinase；CDK)是作用于細(xì)胞周期進(jìn)程中 DNA 復(fù)制期以及有絲分裂期起調(diào)節(jié)作用的酶類,是卵細(xì)胞促進(jìn)因子(MPF)中具有細(xì)胞中蛋白激酶活性的非常重要的具有催化作用的亞單位。細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制劑(CDKIs)是一類重要的細(xì)胞周期調(diào)控蛋白,由于CDKIS在調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程中所起的極其重要的作用,這使它

3、所發(fā)揮的作用在細(xì)胞周期相應(yīng)領(lǐng)域的研究在目前正愈來(lái)愈受到國(guó)內(nèi)外眾多相關(guān)學(xué)者的關(guān)注并對(duì)它進(jìn)行相應(yīng)的研究；細(xì)胞發(fā)生的癌變與細(xì)胞中細(xì)胞周期調(diào)控行為的進(jìn)行發(fā)生異常之間有著非常緊密的關(guān)系,而在它發(fā)生異常的進(jìn)程之中又以CDK4與細(xì)胞發(fā)生癌變關(guān)系最為密切。
及其與結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展臨床病理特征之間相互聯(lián)系進(jìn)行相關(guān)聯(lián)合檢測(cè)統(tǒng)計(jì)分析,我們所應(yīng)用的相關(guān)免疫組化實(shí)驗(yàn)方法為S-P法。
在本次免疫組化實(shí)驗(yàn)研究的目的主要是研究細(xì)胞周期依賴性激酶

4、 4 (cyclin-dependent kinase 4,CDK4)與P27在人結(jié)直腸癌組織中的相關(guān)表達(dá)的區(qū)別與作用及其在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)的臨床意義。
方法：選取2012年間在四川省瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院胃腸外科住院并進(jìn)行手術(shù)治療的 93 例結(jié)直腸癌患者的手術(shù)切除標(biāo)本,30 例結(jié)直腸腺瘤患者手術(shù)切除的標(biāo)本,其中包括70例在結(jié)直腸癌標(biāo)本切下的經(jīng)病理證實(shí)排除惡性可能的正常結(jié)直腸粘膜組織標(biāo)本,運(yùn)用免疫組化SP染色法檢測(cè)所選取的93

5、例結(jié)直腸癌組織標(biāo)本,30例結(jié)直腸腺瘤組織標(biāo)本以及70例正常結(jié)直腸粘膜組織標(biāo)本的切片中CDK4與p27的表達(dá)情況,以及二者在結(jié)直腸癌組織之中的相關(guān)表達(dá)的具體情況同結(jié)直腸癌、腺瘤以及正常組織病理特征之間存在的的關(guān)系,同時(shí)分析CDK4與p27的表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展所起作用的臨床意義及它們的表達(dá)的變化對(duì)于結(jié)直腸癌的預(yù)后之間相關(guān)臨床關(guān)系。
結(jié)果：
1.CDK4 在結(jié)直腸癌組織、結(jié)直腸腺瘤組織以及正常結(jié)直腸粘膜組織中的表達(dá)

6、陽(yáng)性率分別是43.0%(40/93)、36.7%(11/30)、22.9%(16/70),呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)(P﹤0.05)；CDK4 的在結(jié)直腸癌組織中相對(duì)高表達(dá)與結(jié)直腸癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes臨床分期密切相關(guān)。
2. p27 在結(jié)直腸癌組織標(biāo)本、結(jié)直腸腺瘤組織標(biāo)本以及正常結(jié)直腸粘膜組織標(biāo)本中的各自表達(dá)陽(yáng)性率分別是 53.8%(50/93)、63.3%(19/30)、84.3%(59/70)呈現(xiàn)出遞增趨勢(shì)(P﹤0.

7、05)。p27在結(jié)直腸癌組織中的相對(duì)表達(dá)下降與人結(jié)直腸癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes 臨床分期密切相關(guān)。
3. p27 在結(jié)直腸癌中的定位均是胞核或者胞核與胞漿之中,且腫瘤分化程度越低,其越趨向于胞核胞漿同時(shí)表達(dá),且均屬于異常表達(dá)。
4.在結(jié)直腸腫瘤中,CDK4 陽(yáng)性表達(dá)率趨向越高,p27 陽(yáng)性表達(dá)率趨向越低,但是p27在惡性腫瘤的表達(dá)降低并非直接促進(jìn)CDK4表達(dá)的升高,從二者在細(xì)胞周期中的作用看,p27主

8、要是通過(guò)影響CDK4的活性而發(fā)揮作用,進(jìn)而縮短腫瘤細(xì)胞周期。
結(jié)論：
1.CDK4在結(jié)直腸癌組織中呈現(xiàn)出高表達(dá),且與與腫瘤分化程度、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床 Duckes 分期有關(guān),可作為評(píng)定結(jié)直腸癌的病情嚴(yán)重程度以及預(yù)后的一項(xiàng)重要參考指標(biāo)。
2. p27的表達(dá)的水平高低與結(jié)直腸癌本身的分化程度、Duckes臨床分期以及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在著密切的關(guān)系；隨著腫瘤分化程度越低,原來(lái)在細(xì)胞胞核中表達(dá)的p27逐漸