1、研究背景：
　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus, SLE)是一種慢性多系統(tǒng)性的自身免疫性疾病，其以多種自身抗體產(chǎn)生和大量免疫復(fù)合物的沉積為主要特點(diǎn)，并可因此導(dǎo)致體內(nèi)多種組織或器官的損傷。目前為止，SLE的確切發(fā)病機(jī)制尚未闡明。過(guò)去幾十年中的實(shí)驗(yàn)和臨床研究表明，遺傳因素、環(huán)境因素、免疫調(diào)節(jié)因素及其之間的交互作用等共同參與了SLE的疾病進(jìn)程。通過(guò)人類全基因組關(guān)聯(lián)研究（genome-wide a

2、ssociation studies,GWAS），發(fā)現(xiàn)了多個(gè)SLE的易感基因。
　　既往SLE的研究主要集中在編碼基因，而非編碼基因的報(bào)道相對(duì)較少。和那些已經(jīng)被廣泛研究的短鏈非編碼RNA（例如microRNAs）不同的是，長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long noncoding RNA, lncRNA)是一類長(zhǎng)度超過(guò)200個(gè)核苷酸的非編碼RNA，且lncRNAs可能在多種生物學(xué)功能中具有調(diào)節(jié)作用。雖然lncRNAs的確切功能在很大程度上仍然

3、不清楚，但一些研究已經(jīng)表明lncRNAs可能參與了多種關(guān)鍵的生物學(xué)過(guò)程，如染色質(zhì)重塑、基因轉(zhuǎn)錄、RNA剪接和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)等，這暗示它們可能對(duì)人類的多種疾病產(chǎn)生復(fù)雜的影響。
　　最近，多種lncRNAs被認(rèn)為在人類的免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用的，并且它們可能涉及一些由免疫介導(dǎo)的炎癥性疾病的發(fā)病機(jī)理。因此，本研究推測(cè)lncRNAs可能在SLE的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮了重要的作用。
　　目的：
　　檢測(cè)SLE病例和健康對(duì)照外周血單個(gè)

4、核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）中l(wèi)ncRNAs(GAS5, lnc-DC, linc0597 and linc0949)的表達(dá)水平，以及這些lncRNAs基因多態(tài)性與SLE易感性之間的關(guān)聯(lián)。
　　方法：
　　本研究采用兩階段的病例對(duì)照設(shè)計(jì)。在第一階段中，納入85例SLE病例和71例健康對(duì)照，用于檢測(cè)lncRNAs在PBMCs中的表達(dá)水平；當(dāng)發(fā)現(xiàn)有差異表達(dá)的lncR

5、NAs后，第二階段納入860例SLE病例和831例健康對(duì)照用于檢測(cè)其單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)。LncRNAs的表達(dá)水平采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)，基因分型實(shí)驗(yàn)通過(guò)Fluidigm EP1平臺(tái)以及TaqMan SNP探針?lè)中头椒ā?duì)4種lncRNAs表

6、達(dá)水平以及4個(gè)SNP位點(diǎn)的統(tǒng)計(jì)分析進(jìn)行Bonferroni多重校正，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.0125（0.05/4），其余統(tǒng)計(jì)分析檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　結(jié)果：
　?。?）Linc0597，lnc-DC和 GAS5在SLE病例PBMCs中的表達(dá)水平均低于健康對(duì)照中的水平，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=－5.984, P<0.001;Z=－3.703, P<0.001;Z=－2.995, P=0.003）；linc0949的表達(dá)水平在S

7、LE和健康對(duì)照中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=－0.254, P=0.799）。
　　（2）Linc0597在SLE合并狼瘡腎炎（lupus nephritis，LN）組的表達(dá)水平要低于非LN組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=－2.411, P=0.016）且linc0597在SLE合并蛋白尿陽(yáng)性病例中的表達(dá)水平低于蛋白尿陰性病例中的表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=－2.865, P=0.004）。Linc0949，lnc-DC和GAS5的表達(dá)水

8、平在SLE合并LN組與非LN組中差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均有P>0.05）。
　?。?）Linc0597的表達(dá)水平與SLE疾病活動(dòng)度評(píng)分（systemic lupus erythematosus disease activity index2000，SLEDAI-2K）成負(fù)相關(guān)（rs=－0.267，P=0.013）；Linc0949，lnc-DC和GAS5的表達(dá)水平未發(fā)現(xiàn)與SLEDAI-2K評(píng)分存在相關(guān)性（均有P>0.05）。

9、　?。?）四個(gè)SNP位點(diǎn)與SLE的易感性被納入分析：lnc-DC的rs10515177位點(diǎn);linc0597（BZRAP1-AS1)的rs2070107, rs2632516和 rs2877877位點(diǎn)。結(jié)果顯示，linc0597的rs2070107位點(diǎn)基因型CC與GG在SLE病例和健康對(duì)照中的分布頻率存在不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（?2=7.164，P=0.007）。調(diào)整性別、年齡后差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（?2=5.000，P=0.025）；遺傳

10、模型分析顯示，SLE病例和健康對(duì)照在隱形模型（CC vs CG+GG）中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（?2=7.244，P=0.007），調(diào)整性別、年齡后差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（?2=5.220，P=0.022）。其余l(xiāng)ncRNA的SNPs位點(diǎn)（rs10515177, rs2632516, rs2877877）基因多態(tài)性均未發(fā)現(xiàn)與 SLE易感性存在關(guān)聯(lián)（均有P>0.0125）。
　?。?）在34個(gè)SLE病例中的研究發(fā)現(xiàn)，rs2070107位點(diǎn)基因多

11、態(tài)性（CC+CG vs GG）與linc0597在PBMCs中的表達(dá)水平有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=－2.236，P=0.025）。
　　結(jié)論：
　　Linc0597，lnc-DC，GAS5在SLE病例中的表達(dá)水平較健康對(duì)照中的明顯下調(diào)，但linc0949在SLE病例和健康對(duì)照中的表達(dá)水平無(wú)明顯差異。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，SLE合并LN病例中的linc0597表達(dá)水平要低于非LN病例中的，且linc0597的表達(dá)水平可能與SLE疾