1、目的：在小鼠腦外傷模型上研究程序性壞死特異性抑制劑necrostatin-1對腦外傷導致的自噬、凋亡、組織損傷和神經功能損害的影響。
　　方法：采用改良的自由落體裝置，建立成熟雄性小鼠定量腦外傷(traumatic brain injury, TBI)模型。在腦外傷前通過單側側腦室注射 Necrostatin-1(NEC-1)給藥，并在傷后不同時間分別于處死前1 h腹腔注射碘化丙啶(propidium iodide, PI)，采用

2、體視學顯微鏡觀察并計數各組損傷及其周邊區(qū)(皮質與海馬)PI陽性細胞數量。為了進一步確證PI陽性細胞能否代表腦外傷引起的細胞死亡和丟失，我們利用組織缺損體積(lesion volume, LV)對TBI后腦組織損傷程度進行評估；同時利用行為學試驗(Motor Test和Morris水迷宮試驗)評估TBI后各組小鼠的運動和學習記憶的情況，以探究腦外傷導致的組織學損傷能否導致神經功能損害。為了進一步探究 NEC-1是否能夠影響腦外傷后自噬和凋

3、亡的活性，我們利用免疫印記法分別檢測了自噬活性相關蛋白(Beclin-1，LC3，P62)和凋亡活性相關(Bcl-2，caspase-3)的表達水平。同時為了進一步確證NEC-1對腦外傷后自噬和凋亡活性的影響，我們也利用了自噬及凋亡的抑制劑(3MA，Z-VAD)聯合NEC-1檢測了caspase-3和LC3-II的表達。
　　結果：NEC-1減少了TBI引起的細胞丟失數量、組織缺損體積，并降低了TBI后造成的神經功能損害程度。免疫

4、印跡結果表明NEC-1能夠降低TBI后自噬相關蛋白Beclin-1、LC3-II的表達和凋亡相關蛋白Bcl-2、caspase-3的活性。聯合使用3MA和Z-VAD進一步證實了NEC-1的作用，并且表明在TBI后24小時3MA可以同時降低LC3-II和caspase-3的表達，而Z-VAD只降低了caspase-3表達卻增加了LC3-II的轉化。
　　結論：NEC-1能夠抑制TBI引起的自噬和凋亡活性上調，并且NEC-1對于自噬和