1、本文為尋找新的腫瘤相關基因，從22周孕齡人胎肝中克隆鑒定了一個新基因GSDML(Gasdermin-like)，其功能未知，序列分析表明它是GSDMDC家族的新成員，推測其可能也是腫瘤相關基因。GSDML基因定位于17q21.2，在同一區(qū)域定位的還有在惡性腫瘤細胞中經(jīng)常擴增的erbB2基因。GSDML cDNA全長1518bp，編碼403個氨基酸，預測分子量45kD。GSDML蛋白含有一個Gasdermin結構域，一個潛在的核定位信號和

2、兩個可能與核受體相互作用的LXX(L/I)L基序(氨基酸58-62，325-329)。從胎肝cDNA文庫中克隆GSDML基因時，還發(fā)現(xiàn)其它3種短的剪接異構體形式，按預測蛋白分子量由大到小，一并命名為GSDML1、GSDML2、GSDML3、GSDML4。Dot Blot顯示GSDML在76種人組織/細胞中，只在唾液腺中表達。針對GSDML，蛋白序列的抗原表位，制備了GSDML的兔多抗和小鼠單抗，利用這些抗體檢測到多種人源腫瘤細胞系均有G

3、SDML內(nèi)源性表達，而在鼠來源的NIH3T3和猴來源的COS-7細胞中未檢測到其表達。此外，在HEK293、HepG2、MCF7、HNE1、HNE2細胞中檢測到GSDML較短形式的異構體蛋白。免疫組織化學檢測子宮頸癌和肝癌組織芯片，在子宮頸癌臨床樣本中，GSDML在癌組織中的表達顯著高于癌旁和癌遠端；在肝癌臨床樣本中癌、癌旁、癌遠端，GSDML表達無顯著性差別。因此GSDML蛋白可能是子宮頸癌發(fā)生發(fā)展過程中重要的促發(fā)蛋白，它的過表達在高

4、危地區(qū)可能增加子宮頸癌的發(fā)生幾率。同時也提示，GSDML可能與生殖系統(tǒng)特異性腫瘤相關。 為進一步揭示其中的分子機制。結合GSDML含有兩個潛在的核受體結合基序的特征，探討了GSDML與核受體家族主要成員的功能關聯(lián)。利用免疫共沉淀技術揭示GSDML可以特異性的與雌激素受體α(ERα)和甲狀腺激素受體α(TRα)以配體非依賴的方式相互作用，而不與雄激素受體α(ARα)，肝細胞核因子4α(HNF4α)和糖皮質(zhì)激素受體(GR)相互作用。

5、利用RNA干擾敲低GSDML的表達，可以降低細胞內(nèi)ERα的活性及對雌激素的響應能力，提示GSDML可能對ERα有一定的調(diào)控作用。這也是首次發(fā)現(xiàn)GSDMDC家族與核受體家族之間的關聯(lián)。進而，利用MTr法繪制細胞生長曲線表明穩(wěn)定表達GSDML1的NIH3T3細胞比pcDNA3.1-Myc空載體的NIH3T3細胞生長速度顯著加快(P<0.001)，但卻不能使NIH3T3穩(wěn)定株細胞發(fā)生惡性轉化以致獲得集落形成的能力。這表明，GSDML基因可能特