1、SPP(the stromal processing peptidase)是一種葉綠體加工酶，可以加工很多從細胞質(zhì)合成后運輸?shù)饺~綠體的前體蛋白。SPP在雙子葉植物煙草和擬南芥中功能已經(jīng)有報道，但SPP在單子葉植物中的功能未見報道。從EMS誘導(dǎo)水稻突變體庫中，我們篩選到一個早期葉色白化，根發(fā)育在整個生育期都受到抑制的突變體，本文中我們對此材料開展了表型、生理、基因克隆及功能研究，主要研究結(jié)果如下：
　　 1.突變體在整個生育期發(fā)育

2、遲緩，早期葉片白化且卷曲，主根、不定根、側(cè)根生長緩慢。2周后，葉子逐漸變綠，但根系的發(fā)育仍受到抑制。突變體的不定根和側(cè)根數(shù)量減少。研究發(fā)現(xiàn)這分別是由于不定根原基發(fā)育遲緩，側(cè)根原基減l少造成的。生長至成熟期，突變體分蘗數(shù)、穗數(shù)、結(jié)實率均減少。通過進一步分析發(fā)現(xiàn)突變體早期葉綠素合成受阻且葉綠體發(fā)育不正常。
　　 2.遺傳分析表明該突變體受單基因隱性控制。圖位克隆表明定位于第六號染色體RM20424與RM20417之間的OsSPP基因

3、發(fā)生突變。序列比對分析發(fā)現(xiàn)OsSPP基因的ORF的第17個外顯子上缺失了三個堿基，造成了SPP蛋白C端比較保守的結(jié)構(gòu)域中一個谷氨酸的缺失。轉(zhuǎn)基因的回復(fù)實驗驗證了該結(jié)果。
　　 3.RT-PCR結(jié)果表明OsSPP是組成型表達基因。啟動子融合GUS報告基因分析發(fā)現(xiàn)該基因在根的分生區(qū)、側(cè)根形成區(qū)、主根和側(cè)根的中柱、葉鞘和葉片中均有表達。亞細胞定位分析結(jié)果表明OsSPP定位于葉綠體和其它質(zhì)體中。
　　 4.OsSPP包括24個外

4、顯子，23個內(nèi)含子。OsSPP由1246個氨基酸組成，分子量大小約139 kD；對其蛋白結(jié)構(gòu)域分析發(fā)現(xiàn)：OsSPP包含三個保守的結(jié)構(gòu)域：Peptidase_M16， Peptidase_m16_c， Peptidase_m16_c，分別位于：212-314個氨基酸、348-585個氨基酸和916-1140個氨基酸處，突變體在氨基酸945處缺失了一個谷氨酸。
　　 5.定量RT-PCR分析表明：一些和葉綠體發(fā)育有關(guān)的基因，包括核編