1、目的
　　 探討凋亡誘導(dǎo)因子(apoptosis inducing factor,AIF)與波形蛋白(vimentin,VIM)的表達與骨肉瘤患者的年齡、性別、病程分級、腫瘤的體積、分化程度、腫瘤的轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系,其中以“AIF/VIM兩者之間的相互關(guān)系”以及“兩種因子與腫瘤的分級轉(zhuǎn)移之間的相關(guān)關(guān)系”為研究重點。
　　 方法
　　 標本取自1990年1月至2010年1月在中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院骨科活檢及手術(shù)切除

2、的組織共75例,其中骨肉瘤45例,骨軟骨瘤標本30例。所有患者術(shù)前未行放、化療。骨肉瘤患者,年齡12～73歲,中位年齡33.2歲,平均38.2歲;其中低度惡性,組織分化中等的G1期骨肉瘤標本15例,高度惡性組織分化差的G2期骨肉瘤標本30例,所有病例術(shù)前均未化療跟放療。取良性的骨軟骨瘤30例作為對照觀察。
　　 采用鏈霉素親生物素-過氧化物酶免疫組織化學(xué)技術(shù)(SP法)作VIM和AIF抗原檢測,用已知的AIF和VIN抗原陽性的宮頸

3、癌癌組織作為陽性對照,用PBS代替一抗作為陰性對照。石蠟切片經(jīng)脫蠟和水化后,對組織抗原進行修復(fù);每張切片加2滴過氧化酶阻斷溶液,室溫下孵育10min;后加一滴正常非免疫動物血清,室溫下孵育10min;除去血清,切片分別滴加抗AIF抗體、抗VIM抗體,4℃過夜;每張切片加一滴生物素標記的二抗,室溫下孵育10min;然后加一滴鏈霉素菌抗生物素2過氧化物酶溶液,室溫下孵育10min(以上各步間均以PBS充分振洗);滴加新鮮配制的DAB顯色液,

4、室溫5min,PBS沖洗中止顯色反應(yīng),蘇木精襯染,逐級乙醇脫水后二甲苯透明,中性樹膠封片。
　　 應(yīng)用微波SP-免疫組化法,檢測45例骨肉瘤組織中的AIF和VIM的表達水平,根據(jù)染色強度及顯色腫瘤細胞比例將染色結(jié)果分為“-,+,++"3級:①按切片中細胞顯色有無及深淺。評分:無顯色為0分,棕黃色為1分,棕褐色為2分。②根據(jù)顯色腫瘤細胞的比例記分:＜30%為1分;31%～71%為2分;＞71%為3分。每例腫瘤的積分=①+②,按積分

5、高低分為:0分為陰性(-),1～3分為弱陽性(+),4～6分為強陽性(++)。統(tǒng)計學(xué)處理采用X2檢驗相關(guān)分析。
　　 結(jié)果
　　 45例骨肉瘤組織中AIF和VIM在骨肉瘤細胞中表達陽性率分別為66.70%(30/45)和73.81%(33/45),AIF與VIM在骨軟骨瘤組織中低表達;AIF和VIM在骨肉瘤組織中表達無顯著相關(guān)性(P＞0.05):AIF與VIM在骨肉瘤中的表達與性別、年齡、病程、腫瘤體積、分化程度無關(guān)(P