1、目的： 通過(guò)檢測(cè)急性白血病患者和對(duì)照組兒童中CYP3A5-6986位點(diǎn)的基因型分布特點(diǎn)，探討CYP3A5基因多態(tài)性與兒童急性白血病易感的相關(guān)性；檢測(cè)急性白血病患者的CYP3A5mRNA表達(dá)水平，探討基因表達(dá)水平對(duì)白血病患者治療、預(yù)后評(píng)價(jià)的指導(dǎo)意義。 方法： 1、采用病例-對(duì)照研究，應(yīng)用聚合酶鏈-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法及PCR產(chǎn)物序列測(cè)定，檢測(cè)兒童急性白血病患者139例，其中包括急性淋巴細(xì)胞性

2、白血病(ALL)91例，急性髓細(xì)胞性白血病(AML)48例，和120例對(duì)照組兒童的CYP3A5-6986位點(diǎn)基因型分布及等位基因頻率。 2、用實(shí)時(shí)定量RT-PCR法檢測(cè)34例初診的ALL、32例AML患兒及20例對(duì)照組兒童的骨髓單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)wt-CYP3A5和SV1-CYP3A5mRNA的表達(dá)水平及對(duì)部分病例進(jìn)行跟蹤隨訪。同時(shí)結(jié)合患兒的性別、FAB分型、染色體數(shù)量核型各項(xiàng)指標(biāo)綜和分析。 結(jié)果： 1、對(duì)照組和急性白

3、血病兒童中CYP3A5-6986多態(tài)性位點(diǎn)存在野生型(CYP3A5<'*>1/<'*>1)、雜合突變型(cYP3A5<'*>1/<'*>3)、純合突變型(CYP3A5<'*>3/<'*>3)三種基因型：對(duì)照組與ALL組、AML組的基因型及等位基因頻率分布存在顯著性差異。 2、①66例初診AL患者中CYP3A5<'*>1/<'*>1基因型15例，<'*>1/<'*>3基因型16例，<'*>3/<'*>3基因型35例。三種基因型內(nèi)均

4、能檢測(cè)到野生型mRNA(wt-mRNA)，變異型mRNA(SV1-mRNA)存在于<'*>1/<'*>3和<'*>3/<'*>3基因型中。無(wú)論是CYP3A5<'*>1/<'*>3還是CYP3A5<'*>3/<'*>3基因型，wt-mRNA和SV1-mRNA均明顯相關(guān)，r分別為0.790和0.847。②66例初診AL患兒按基因型分組后對(duì)他們的mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，三組的wt-mRNA檢測(cè)結(jié)果分別為27.78±13.25、8.4±3.2

5、3、0.8±1.73，存在顯著性差異(P均

6、A表達(dá)水平高低沒(méi)有影響。但伴有t(1：19)、t(9；22)或t(4；11)異常核型的初診ALL患者wt-CYP3A5m RNA與高于正常核型的ALL患者。⑤對(duì)兩例ALL患兒在不同時(shí)期(包括初診、緩解期、復(fù)發(fā)前)進(jìn)行CYP3A5表達(dá)水平的跟蹤檢測(cè)，復(fù)發(fā)前wt-CYP3A5的表達(dá)水平較前升高。 結(jié)論： 1、CYP3A5 6986G多態(tài)性與兒童急性白血病的易感性可能相關(guān)。 2、實(shí)時(shí)定量PCR的方法證實(shí)了CYP3A5在