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文檔簡介
1、喘息是5歲以下兒童常見的呼吸道癥狀,由于年齡特異的病理生理特點,喘息在嬰幼兒中常常反復發(fā)生,部分喘息是兒童哮喘的早期表現(xiàn),因此從5歲以下喘息兒童中把可能發(fā)展為持續(xù)性哮喘的患兒識別出來并進行有效早期干預是非常必要的,但是由于并非所有的患兒都會發(fā)展為哮喘,所以合理地選擇干預對象仍缺少客觀的指標。
目的:
本臨床研究在分子水平分析5歲以下反復喘息患兒胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)基因多態(tài)性,并觀察其基因多態(tài)性與外
2、周血TARC、IgE及EOS水平的關系,以探討TARC基因多態(tài)性分布與5歲以下兒章反復喘息發(fā)病機制之間的關系。
材料和方法:
本實驗設為喘息組與對照組。喘息組研究對象均來自2009年10月-2010年5月本院兒科呼吸門診就診和病房住院患兒,均為中國河南地區(qū)漢族兒童,均為急性發(fā)作期,均在過去的12個月內(nèi)至少有3次喘息發(fā)作或過去6個月內(nèi)至少有2次喘息發(fā)作,均排除先天性疾病引起的喘息,患兒自身有醫(yī)生診斷的過敏性疾病
3、(包括濕疹、變應性皮炎、過敏性鼻炎、食物過敏)或父母一方或雙方有哮喘病史者為特應質(zhì)高危因素,有高危因素之一者為喘息Ⅰ組(70例),無高危因素者為喘息Ⅱ組(48例)。所有患兒2周內(nèi)均無全身或局部哮喘藥物治療史。同期于本院外科疝氣、腎結(jié)石等非感染性疾病術前患兒中隨機抽取40例作為對照組,均排除特應質(zhì)高危因素,且最近2周內(nèi)無感染性疾病史,無激素使用史,無其他免疫調(diào)節(jié)劑使用史。所有入組兒童均為足月出生,3組年齡、性別均無統(tǒng)計學差異(P>0.05
4、);均獲得其家長知情同意。
采用聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法檢測TARC啟動子-431位點C/T基因多態(tài)性,比較三組研究對象TARC啟動子-431位點的基因型頻率及等位基因頻率;采用酶聯(lián)免疫吸附實驗法(ELISA)測定3組患兒外周血TARC及總IgE水平,采用伊紅染色法進行外周血EOS計數(shù)。對三組患兒的外周血TARC、總IgE及EOS計數(shù)水平均值進行比較,并對每組中各基因型的外周血TARC、
5、總IgE及EOS計數(shù)水平均值進行比較。
結(jié)果:
1.三組中CC、CT、TT3種基因型均可見,且均以CT雜合子基因型為主,其中喘息Ⅰ組CC、CT、TT基因型頻率為31.4%、5.7%、12.9%,T、C等位基因頻率為40.7%、59.3%;喘息Ⅱ組CC、CT、TT基因型頻率分別為35.4%、54.2%、10.4%,T、C等位基因頻率為37.5%、62.5%;對照組CC、CT、TT基因型頻率為37.5%、52.5
6、%、10.0%,T、C等位基因頻率為42%、58%。三組間比較各基因型頻率及等位基因頻率均無統(tǒng)計學意義(P值均>0.05)。
2.喘息Ⅰ組TARC及EOS計數(shù)水平均高于喘息Ⅱ組(P值均<0.01)和對照組(P值均<0.01),其中喘息Ⅱ組和對照組比較,TARC及EOS計數(shù)均無統(tǒng)計學差異(P值均>0.05);喘息Ⅰ組、Ⅱ組血清IgE水平均高于對照組(P值均<0.01),而喘息Ⅰ組與喘息Ⅱ組比較,IgE水平無統(tǒng)計學差異(P>0
7、.05)。
3.相關性分析顯示喘息Ⅰ組外周血TARC與EOS計數(shù)呈正相關關系(r=0.872,P<0.01),而TARC與IgE及EOS與IgE無相關。喘息Ⅱ組及對照組TARC與EOS,TARC與IgE及EOS與IgE均無相關。
4.喘息Ⅰ組TARC基因型中,TT基因型TARC水平明顯高于CT基因型(Z=-3.209,P<0.01)和CC基因型(Z=-3.656,P<0.01);喘息Ⅱ組及對照組各基因型TAR
8、C水平差異均無統(tǒng)計學意義(H=0.274,P>0.05;H=2.177,P>0.05)。
5.喘息Ⅰ組TARC基因型中,TT基因型外周血IgE水平明顯高于CT基因型(Z=-4.043,P<0.01)和CC基因型(Z=-3.278,P<0.01);喘息Ⅱ組及對照組各基因型間外周血IgE水平差異均無統(tǒng)計學意義(H0.846,P>0.05;H=1.934,P>0.05)。
6.喘息Ⅰ組TARC基因型中,TT基因型E
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