1、傷寒沙門菌(salmonella typhi，S.typhi)是重要的腸道致病菌，屬胞內寄生菌，它可引起傷寒等嚴重疾病。巨噬細胞是人體主要的吞噬細胞，它在許多病原體的清除和破壞中起重要作用。傷寒沙門菌在巨噬細胞內生存、增殖的能力與其致病性密切相關。近來研究發(fā)現(xiàn)傷寒沙門菌感染后可導致巨噬細胞異常凋亡，從而逃脫機體天然免疫系統(tǒng)的識別。但傷寒沙門菌引起細胞凋亡的確切機制及環(huán)境條件對細胞凋亡的影響還有待于進一步研究。其中就包括傷寒沙門菌被巨噬細

2、胞吞噬后所遭遇的細胞內的氧化應激環(huán)境。本課題擬用H2O2刺激傷寒沙門菌的生長以模擬體內的氧化條件，用人白血病細胞系THP-1細胞經PMA分化的巨噬細胞為模型，探討傷寒沙門菌及其氧化條件下對巨噬細胞凋亡的影響，以深入了解傷寒沙門菌的致病機制。
　　用傷寒沙門菌及其氧化菌分別感染PMA分化的THP-1細胞，同時設立空白對照，于作用后2，6，12，24小時終止培養(yǎng)， Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞儀檢測顯示傷寒沙門菌及其

3、氧化菌誘導巨噬細胞凋亡率與對照組相比明顯增高(P<0.01)；傷寒沙門菌氧化組與傷寒沙門菌相比，巨噬細胞在2h，6h和8h時間段的凋亡率明顯增高（P<0.05）；隨作用時間的延長，在前12h內各組巨噬細胞的凋亡率逐漸增加（P<0.05）。苔盼藍染色進行活細胞記數(shù)顯示隨感染時間的延長，各實驗組染成蘭色的壞死細胞增多（P<0.05），對照組不受影響。
　　采用同樣的方法感染THP-1細胞，同時設立正常對照，于作用后6小時終止培養(yǎng)。硫代

4、巴比妥酸法檢測丙二醛(malondialdehyde，MDA)，結果顯示:傷寒沙門菌氧化組與傷寒沙門菌誘導巨噬細胞產生丙二醛與對照組相比明顯增高(P<0.05)；傷寒沙門菌氧化組與傷寒沙門菌相比，巨噬細胞產生丙二醛明顯增高(P<0.05)。黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化歧化酶(superoxide dismutase，SOD)，結果顯示:傷寒沙門菌氧化組與傷寒沙門菌誘導巨噬細胞產生超氧化歧化酶與對照組相比明顯降低(P<0.05)；傷寒沙門菌氧

5、化組與傷寒沙門菌相比，巨噬細胞產生超氧化歧化酶明顯降低(P<0.05)。硝酸還原酶法和ELISA法分別檢測培養(yǎng)液中一氧化氮(NO)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)濃度變化，結果顯示傷寒沙門菌氧化組與傷寒沙門菌組NO和TNF-α濃度較對照組明顯升高（P<0.05），而且在巨噬細胞凋亡高峰時維持較高水平。
　　四甲基噻唑氮藍(MTT)法檢測細胞活力,結果顯示:傷寒沙門菌氧化組與傷寒沙門菌相比，巨噬細胞活力明顯降低(P<0.05)。