1、目的:研究大潮氣量機械通氣致兔急性肺損傷(ALI)后肺組織在炎癥發(fā)生發(fā)展及愈合修復過程中血管細胞粘附因子(VCAM-1)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的動態(tài)表達變化及其與損傷時間的關系。
　　方法:(1)以兔存活率、肺水腫及病理組織改變程度為衡量標準,建立大潮氣量機械通氣致兔急性肺損傷的動物模型。(2)按兔急性肺損傷模型分別在急性肺損傷后不同時間點肺標本取材,實驗方法包括:右上肺組織濕干重比(W/D)比較不同時間點肺水腫情況;常規(guī)

2、HE染色反映肺損傷后肺組織病理形態(tài)學改變;免疫組織化學染色(SABC法)檢測VCAM-1及VEGF的表達變化;免疫蛋白印跡(western blotting)檢測VCAM-1和VEGF表達情況。
　　結果:實驗組B(VT60ml/kg)與實驗組A(VT45ml/kg)比較,肺組織病理改變和炎癥反應明顯,肺水腫程度嚴重;與實驗組C(VT68ml/kg)比較,雖然病理改變和肺水腫程度差異小,但具有兔存活率高(91.67％)的特點。因此

3、,選擇試驗組 B作為大潮氣量機械通氣致急性肺損傷動物模型標準,符合下一步研究的實驗需要。
　　在大潮氣量機械通氣致急性肺損傷動物模型的基礎上,檢測實驗組( VT60ml/kg)肺損傷后12~24h肺水腫程度及病理改變最嚴重;VCAM-1在急性肺損傷后3h開始在肺泡上皮細胞和肺血管內(nèi)皮細胞內(nèi)表達,3~12h內(nèi)逐步上升,并在12h達到高峰,之后隨時間延長逐漸下降,約在24h后未見表達;VEGF在急性肺損傷后12h在肺泡上皮細胞和肺血管

4、內(nèi)皮細胞內(nèi)表達開始增加,在此后的36h內(nèi)呈不斷上升的趨勢。
　　對圖像分析數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,分別曲線擬合VCAM-1在ALI后0~48h內(nèi)及VEGF在ALI后6~48h內(nèi)的數(shù)學回歸方程式推斷損傷時間。
　　結論:(1)成功建立大潮氣量機械通氣致急性肺損傷動物模型,建立指標為 VT60ml/kg、R50次/分、Fi0221%。
　　(2)VCAM-1參與了在大潮氣量機械通氣致急性肺損傷后肺組織炎癥發(fā)生發(fā)展過程;而 VE