1、目的:心肌再灌注治療挽救缺血心肌的同時,心肌恢復血流可能加重缺血造成的損傷,即引起缺血再灌注損傷(myocardial ischemia reperfusioniniury,MIRI)。近年來研究表明,心肌細胞凋亡也是心肌細胞的一種重要的死亡形式,在MIRI病理生理過程中發(fā)揮著重要作用,與梗死灶的發(fā)展有關。Rho激酶介導了細胞凋亡。
　　 本研究通過建立大鼠心肌缺血再灌注模型,觀察缺血再灌注大鼠心肌細胞凋亡及Bcl.2和Bax表

2、達的情況,以評價不同劑量Rho激酶抑制劑(法舒地爾Fasudil)對大鼠I/R后心肌的保護作用。
　　 方法:健康雄性Spingue Dawley(SD)大鼠,普通飼料適應性喂養(yǎng)1周后,隨機分為5組,即假手術組(Sham):大鼠開胸暴露左冠狀動脈,穿線但不作結扎,于穿線30分鐘后腹腔內(nèi)注射生理鹽水0.5ml,觀察165分鐘；缺血再灌注組(ischemia reperfusion,I/R):收緊結扎線阻斷冠狀動脈左前降支缺血45分

3、鐘,于再灌注前15分鐘腹腔內(nèi)注射生理鹽水0.5ml,放松結扎線再灌注120分鐘；法舒地爾大劑量治療組(HDF):收緊結扎線阻斷冠狀動脈左前降支缺血45分鐘,于再灌注前15分鐘腹腔內(nèi)給予法舒地爾(30mg/kg),放松結扎線再灌注120分鐘；法舒地爾中劑量治療組(IDF):收緊結扎線阻斷冠狀動脈左前降支缺血45分鐘,于再灌注前15分鐘腹腔內(nèi)注射法舒地爾(10mg/kg),放松結扎線再灌注120分鐘；法舒地爾小劑量治療組(I,DF):收緊結

4、扎線阻斷冠狀動脈左前降支缺血45分鐘,于再灌注前15分鐘腹腔內(nèi)注射法舒地爾(5mg/kg),放松結扎線再灌注120分鐘；再灌注120分鐘后再次阻斷冠狀動脈血流,伊文藍.紅四氮唑雙染色,常規(guī)HE染色,TUNEL法檢測缺血區(qū)凋亡細胞,免疫組織化學染色法檢測缺血區(qū)Bcl-2和Bax的表達。
　　 結果:
　　 1心肌組織形態(tài)學變化
　　 假手術組大鼠心肌纖維排列規(guī)則,結構清晰,細胞核呈橢圓型,心肌細胞之間間隙緊密,細胞

5、形態(tài)學表現(xiàn)基本正常；I/R組可見大量心肌細胞變性、心肌組織水腫,病理改變程度較HDF組、IDF組及LDF組大鼠的明顯加重；HDF組較IDF組及LDF大鼠心肌病理改變程度輕；IDF組大鼠心肌病理改變程度與LDF組相當。
　　 2心肌細胞凋亡情況
　　 與Sham組相比,I/R組、LDF組、IDF組及HDF組缺血區(qū)心肌細胞凋亡指數(shù)均顯著升高,且差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；與I/R組相比,LDF組、IDF組及HDF組心肌

6、細胞凋亡指數(shù)均顯著降低,且差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；HDF組與IDF組、LDF組比較心肌細胞凋亡指數(shù)顯著降低,差別均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；IDF組和LDF組比較心肌細胞凋亡指數(shù)無明顯差異,差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 3 Bcl-2基因蛋白的表達情況
　　 與Sham組相比,I/R組、LDF組、IDF組及HDF組缺血區(qū)心肌細胞Bcl-2蛋白的表達均顯著降低,且差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；

7、與I/R組相比,LDF組、IDF組及HDF組Bcl-2蛋白的表達均顯著升高,且差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；HDF組與IDF組、LDF組比較Bcl-2蛋白的表達顯著升高,差別均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；IDF組和LDF組比較Bcl-2蛋白的表達無明顯差異,差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 4 Bax基因蛋白的表達情況
　　 與Sham組相比,I/R組、LDF組、IDF組缺血區(qū)心肌細胞Bax蛋白的表達均顯著

8、升高,且差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；與Sham組相比,HDF組缺血區(qū)心肌細胞Bax蛋白的表達也顯著升高(P<0.05)；與I/R組相比,LDF組、IDF組及HDF組Bax蛋白的表達均顯著降低,且差別有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；HDF組和IDF組、LDF組比較Bax蛋白的表達均顯著降低,差別均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；IDF組和LDF組比較Bax蛋白的表達無明顯差異,差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 結論:本研