1、目的通過(guò)檢測(cè)慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者氣道上皮的Ca<'2+>激活的氯離子通道l(CaCC<,l>)和黏蛋白MUC5AC、黏膜下腺黏蛋白的表達(dá)，以探討COPD患者氣道黏液高分泌的機(jī)制。 方法取2004年華西醫(yī)院胸外科手術(shù)病人45份離體肺標(biāo)本，其中輕度COPD組(8人)、中重度COPD組(17)和正常對(duì)照組(20人)，分別用RT-PCR、原位雜交、免疫組化、阿辛蘭-PAS染色檢測(cè)氣道上皮細(xì)胞CaCC<,l>、M17C5AC以

2、及黏蛋白的表達(dá)。分別計(jì)算三組標(biāo)本RT-PCR目標(biāo)條帶與內(nèi)對(duì)照光密度比值及計(jì)算原位雜交、免疫組化三組標(biāo)本氣道上皮與背景光密度比值并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)算阿辛蘭—PAS染色三組標(biāo)本黏膜下腺著色面積與同視野下支氣管組織面積比值然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果與正常對(duì)照組相比較，COPD組患者氣道上皮CaCC<,1>表達(dá)較對(duì)照組增強(qiáng)(P=0.01)，并且CaCC<,l>的表達(dá)增強(qiáng)與COPD患者的氣道氣流受限嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。COPD組患者氣道上皮M

3、UC5AC表達(dá)較對(duì)照組增加(P=0.01)；COPD組黏膜下腺分泌黏蛋白較對(duì)照組增加(P=0.01)。其氣道上皮CaCC<,1>表達(dá)與FEV<,1>／FVC、FEV<,1>％Pred、V<,50>％Pred、V<,25>％Pred成負(fù)相關(guān)(P=0.01、P=0.01、P=0.03、P=0.03)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.43、-0.43、-0.35、-0.36。COPD患者氣道上皮CaCC<,1>mRNA表達(dá)與患者氣道上皮MUC5ACmRN

4、A表達(dá)、黏膜下腺著色面積成正相關(guān)(P=0.02，P=0.01)，相關(guān)系數(shù)為0.39，0.46。COPD患者氣道上皮MUC5AC mRNA表達(dá)與其FEV<,1>／FVC、FEV<,1>％pred、V<,50>％pred、V<,25>％pred成負(fù)相關(guān)(P=0.01、P=0.01、P=0.01、P=0.01)，相關(guān)系數(shù)分別為—0.53、—0.53、—0.48、—0.43；與黏膜下腺黏液著色面積成正相關(guān)(P=0.02)，相關(guān)系數(shù)為0.43。

5、 結(jié)論 COPD患者的氣道上皮CaCC<,l>較對(duì)照組表達(dá)增加，CaCC<,1>可能參與了COPD患者氣道黏液分泌的調(diào)節(jié)。 目的通過(guò)檢測(cè)慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者氣道上皮水通道5(Aquaporin-5，AQP<,5>)和黏蛋白MUC5AC、黏膜下腺黏蛋白的表達(dá)，以探討COPD患者氣道黏液高分泌的機(jī)制。方法取2004年華西醫(yī)院胸外科手術(shù)病人離體標(biāo)本，根據(jù)術(shù)前檢查結(jié)果將患者分為輕度COPD組(8人)、中重度COPD

6、組(17)和對(duì)照組(20人)，分別用RT-PCR、原位雜交、免疫組化、阿辛蘭—PAS染色檢測(cè)氣道上皮細(xì)胞AQP5、MUC5AC以及黏蛋白的表達(dá)。計(jì)算三組標(biāo)本RT-PCR目標(biāo)條帶與內(nèi)對(duì)照光密度比值及分別計(jì)算原位雜交、免疫組化三組標(biāo)本氣道上皮與背景光密度比值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)算阿辛蘭—PAS染色三組標(biāo)本黏膜下腺著色面積與同視野下支氣管組織面積比值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果與正常對(duì)照組相比較，COPD組患者氣道上皮AQP<,5>表達(dá)較對(duì)照組減

7、弱(P=0.01)，兩組患者肺組織AQP5表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。-并且AQP<,5>的表達(dá)減弱與COPD患者的氣道氣流受限嚴(yán)重程度有關(guān)。COPD組患者氣道上皮M1JC5AC表達(dá)較對(duì)照組增加(P=0.01)：COPD組黏膜下腺分泌黏蛋白較對(duì)照組增加(P=0.01)。黏膜下腺AQP<,5>mRNlA表達(dá)與患者FEV<,1>／FVC、FEV<,1>[％]pred、V<,50>[％]pred、V<,25>[％]pred成正相關(guān) (P

8、=0.01、P=0.01、P=0.01、P=0.01)，相關(guān)系數(shù)分別為0.60、0.60、0.55、0.45；與患者氣道上皮MUC5ACmRNA表達(dá)成負(fù)相關(guān)(P=0.01)，相關(guān)系數(shù)為-0.45；與黏膜下腺著色面積成負(fù)相關(guān)(P=0.01)，相關(guān)系數(shù)為-0.61。氣道上皮MUC5AC mRNA表達(dá)與患者FEV<,1>／FVC、FEV<,1>％pred、V<,50>％pred、V<,25>％pred成負(fù)相關(guān)(P=0.01、P=0.01、P=