鴨腫頭敗血癥病毒疫苗免疫應(yīng)答及病理學研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、鴨腫頭敗血癥(DuckSwollenHeadSepticemia,DSHS)是近年流行的、以腫頭、全身敗血、高發(fā)病率、高死亡率為特征的一種鴨急性病毒性傳染病。該病給當?shù)仞B(yǎng)鴨業(yè)帶來極大的損失?!傍喣[頭敗血癥”與鴨瘟等疫病在臨床癥狀、病理變化等方面有許多相似之處,給臨床診斷帶來困難;而且當前存在著缺乏有效免疫方法,以及致病機理不清楚等問題。本研究建立了鴨腫頭敗血癥病毒抗體的間接ELISA方法,并在此基礎(chǔ)上作了鴨腫頭敗血癥疫苗的免疫應(yīng)答研究,

2、以及鴨腫頭敗血癥的鴨胚病理學研究。 首先,本研究采用葡聚糖G-200層析技術(shù)純化鴨腫頭敗血癥病毒(DuckSwollenHeadSepticemiaVirus,DSHSV),用純化的DSHSV作為包被抗原,建立了檢測DSHSV滅活疫苗免疫后的鴨血清中特異性抗體的ELISA方法。確定了抗原最佳包被濃度為6μg/ml,封閉液為2%明膠,待測血清稀釋度為1∶400,兔抗鴨血清稀釋度為1∶800,酶標羊抗兔的最佳稀釋度為1∶2000,血

3、清樣品陽性樣品判斷的臨界值OD490nm值為0.44。建立的方法敏感性高,重復(fù)性好,特異性強,不與鴨腫頭敗血癥陰性血清、鴨大腸桿菌陽性血清、鴨瘟、鴨肝炎病毒陽性血清呈現(xiàn)交叉反應(yīng)。 在此基礎(chǔ)上,應(yīng)用建立的間接ELISA方法、玫瑰花環(huán)試驗、攻毒保護試驗研究鴨腫頭敗血癥疫苗免疫應(yīng)答。試驗結(jié)果表明,兩種疫苗在一免后7-14d,蜂膠苗組E花環(huán)結(jié)合率極顯著高于其它組(P<0.01);在一免后21-84d,油苗2組E花環(huán)結(jié)合率極顯著高于其它組

4、(P<0.01)。在一免后7-21d,蜂膠苗2組EA花環(huán)結(jié)合率極顯著高于其它組(P<0.01);在一免后28-84d,油苗2組EA花環(huán)結(jié)合率極顯著高于其它組(P<0.01),試驗組B細胞免疫水平均高于對照組(P<0.01)。而且在一免后7-56d,蜂膠苗2組的特異性抗體水平極顯著高于其他組(P<0.01),試驗組的特異性抗體水平極顯著高于對照組(P<0.01)。強毒攻擊的試驗結(jié)果表明兩種疫苗對強毒的攻擊都有保護力,保護率分別是蜂膠苗2組

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