1、目的：本研究采用Cortvrindt建立的卵泡體外培養(yǎng)體系，培養(yǎng)小鼠竇前卵泡，比較不同直徑的竇前卵泡的培養(yǎng)結(jié)果，說明不同分級竇前卵泡對卵母細(xì)胞成熟有否影響。檢測體外培養(yǎng)得到MⅡ卵母細(xì)胞GSH含量、皮質(zhì)顆粒遷移和分布和微管蛋白聚合情況，比較其與體內(nèi)成熟卵母細(xì)胞的差異，說明這些改變與卵母細(xì)胞發(fā)育潛能降低之間的關(guān)系，為今后提高卵母細(xì)胞質(zhì)量提供一定線索。追蹤竇前卵泡從卵巢分離到培養(yǎng)最后階段排出卵子卵丘復(fù)合物的全過程，檢測卵母細(xì)胞GDF-9基因表

2、達(dá)的變化，比較其與同階段體內(nèi)發(fā)育卵母細(xì)胞GDF-9基因表達(dá)的差異，闡明體外生長的卵母細(xì)胞在哪些階段功能異常。本研究同時(shí)檢測卵泡kitligand基因表達(dá)改變，結(jié)合卵母細(xì)胞和卵泡細(xì)胞的表現(xiàn)，應(yīng)用卵泡發(fā)育的新的理論，探討卵泡發(fā)育過程中與卵母細(xì)胞成熟相關(guān)的因素以及體外生長發(fā)育的卵母細(xì)胞功能異常的原因，為改善體外培養(yǎng)卵泡的條件提供一定依據(jù)。本研究通過對體外培養(yǎng)和體內(nèi)生長卵泡不同階段的分析，試圖說明卵泡在哪個階段發(fā)育異常導(dǎo)致最終卵母細(xì)胞的質(zhì)量降低

3、，以及哪些因素可能參與這些變化。這種動態(tài)分析有助于更有針對性改進(jìn)卵泡培養(yǎng)體系。結(jié)論：　　1、小鼠竇前卵泡培養(yǎng)后可以得到MⅡ卵母細(xì)胞，目前的培養(yǎng)體系培養(yǎng)4級以上(包括4級)的卵泡，卵母細(xì)胞成熟率達(dá)到56.6％?！　?、體外發(fā)育成熟卵母細(xì)胞直徑較小，GSH含量較低，皮質(zhì)顆粒分布異常，正常紡錘體比例低，造成卵母細(xì)胞發(fā)育潛能低?！　?、體外發(fā)育卵母細(xì)胞在竇泡早期GDF-9基因表達(dá)異常，可能影響卵泡細(xì)胞kitligand和LH受體基因表達(dá)