1、目的： 調(diào)查從我院患者臨床標本中分離的奇異變形桿菌對氨基糖苷類藥物的耐藥情況，檢測16SrRNA甲基化酶在奇異變形桿菌臨床分離株中的流行情況。 方法： 收集我院2004年5月至2007年9月198株從臨床標本中分離的奇異變形桿菌，所有菌株均為非重復(fù)株。菌種鑒定和初步藥敏試驗采用全自動微生物分析儀，對慶大霉素、阿米卡星和妥布霉素任一耐藥的菌株被篩選為測試菌株。采用K-B法和瓊脂稀釋法對氨基糖苷類藥物進行進一步藥敏試

2、驗。超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測采用雙紙片擴散法。使用PCR檢測16SrRNA甲基化酶基因、整合酶基因和ESBL基因。接合試驗和轉(zhuǎn)化試驗檢測質(zhì)粒的可轉(zhuǎn)移性；采用質(zhì)粒中量抽取試劑盒抽取16SrRNA甲基化酶基因陽性株的質(zhì)粒，研究耐藥質(zhì)粒譜。采用Southern hybirdization證實16SrRNA甲基化酶基因是否位于質(zhì)粒上。 結(jié)果： 198株奇異變形桿菌中，21株至少耐一種氨基糖苷類藥物，被篩選為16S rR

3、NA甲基化酶基因陽性可疑株。其中21株耐慶大霉素，耐藥率為10.6％(21/198)；19株耐藥妥布霉素，耐藥率為9.6％(19/198)；6株耐阿米卡星，耐藥率為3.0％(6/198)。6株耐阿米卡星株同時耐慶大霉素和妥布霉素。21株耐氨基糖苷類藥物的菌株有9株分離自痰液，7株分離自尿液，5株分離自創(chuàng)面膿液。經(jīng)PCR檢測和DNA測序，5株16S rRNA甲基化酶基因陽性，陽性率為2.5％(5/198)，其中1株armA陽性、4株rmt

4、B陽性。RmtA、rmtC、rmtD和npmA均為陰性。所有甲基化酶基因陽性株對慶大霉素、妥布霉素和阿米卡星同時耐藥且都為高度耐藥(MICs，≥256mg/L)，5株甲基化酶基因陽性菌株有1株產(chǎn)ESBLs，ESBL基因為CTX-M-14。5株均為Ⅰ類整合酶基因陽性。4株通過接合試驗把質(zhì)粒傳遞給受體菌E.coli J53。5株甲基化酶基因陽性株通過Southern hybirdization證實均位于質(zhì)粒上。 結(jié)論： 本次