雙醋瑞因?qū)顷P節(jié)炎關節(jié)軟骨退變過程中結締組織生長因子(CTGF)表達的影響.pdf_第1頁
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1、背景:骨關節(jié)炎(OA)是最常見的一種關節(jié)炎并且是致殘的主要原因。目前關于骨關節(jié)炎的病因尚未完全清楚,治療目的主要是減輕疼痛、改善運動和功能。雙醋瑞因是近年來治療 OA的新藥,其能抑制軟骨降解,促進軟骨修復,從而具有保護軟骨的作用。臨床應用雙醋瑞因治療骨關節(jié)炎已取得了良好的效果,但其治療的確切機制尚不清楚。
  目的:本研究的目的是將不同濃度的雙醋瑞因作用于體外 IL-1β誘導的大鼠關節(jié)軟骨細胞中,觀察其對關節(jié)軟骨細胞的影響及其可能

2、的作用機制,為雙醋瑞因在臨床上的應用提供理論依據(jù)。
  方法:
  (1)體外培養(yǎng)SD大鼠關節(jié)軟骨細胞,HE染色和II型膠原免疫熒光染色鑒定軟骨細胞,rhIL-1β刺激軟骨細胞制備體外OA模型。
 ?。?)實驗分成正常對照組、模型組(10ng/ml rhIL-1β)和實驗組(不同濃度雙醋瑞因+10ng/ml rhIL-1β)。
  (3)利用①MTT比色法觀察軟骨細胞的增殖情況;②Annexin V-FITC/P

3、I雙染細胞,流式細胞術觀察軟骨細胞凋亡率;③應用 Western Blot和RT-PCR從蛋白質(zhì)和mRNA兩水平檢測結締組織生長因子的表達。以上實驗均重復三次。
  結果:
 ?。?)原代軟骨細胞呈多角形,胞質(zhì)均勻,HE染色成紅色;免疫熒光染色后陽性部位呈現(xiàn)黃綠色。
 ?。?)MTT法結果顯示:與正常對照組比較,雙醋瑞因能促進軟骨細胞MTT增殖活性以濃度為10-5M更明顯,IL-1β作用后各實驗組軟骨細胞增殖能力下降,

4、但與正常對照組比較濃度為10-4M和10-5M雙醋瑞因仍能促進軟骨細胞MTT增殖活性。
 ?。?)軟骨細胞凋亡的檢測結果顯示:與正常對照組對比加rhIL-1β的模型對照組能夠顯著促進軟骨細胞的凋亡。而加雙醋瑞因組軟骨細胞凋亡率明顯減少,與模型對照組比較有統(tǒng)計學意義。
 ?。?)Western Blot檢測結果顯示:IL-1β能夠降低 CTGF的表達,與正常組比較有統(tǒng)計學差異,濃度為10-5M雙醋瑞因能夠顯著促進 IL-1β誘

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