新型鈣離子拮抗劑JTV逆轉P-gp介導的K562-MDR細胞多藥耐藥的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文新型鈣離子拮抗劑JTV逆轉Pgp介導的K562MDR細胞多藥耐藥的研究姓名：車曉芳申請學位級別：碩士專業(yè)：內科學指導教師：劉云鵬2001.4.1染的K562MDR細胞在含10%胎牛血清(FCS)的RPMI1640培養(yǎng)液中，KB一C:細胞在含10%FCS的MEM培養(yǎng)液中常規(guī)37℃條件下傳代培養(yǎng)。二、膜泡的制備:1x10，細胞懸于buferA(lOmMTris一HCIpH7.40.25MSucrose0.2mMCaC

2、l2)中，4℃下加氮氣壓28kgc擴30min后，懸于buferB(IOmMTri，一HCIpH7.40.25MSucrose)中，離心后取上清鋪于35%的蔗搪墊(lommTri。一HCIpH7.435%Sucrose1mMEDTA)上，16000xg30min，取中間層100000xg45min，將沉淀重懸于buferB中，Bradford法進行蛋白定量，一50℃保存。三、K562MDR細胞P一9p表達的檢測:應用Westernblo

3、t及流式細胞儀檢測K562MDR細胞P一9p的表達。四、K562MDR細胞藥物敏感性的檢測:用MTT法檢測K562及K562MDR細胞對各種藥物的敏感性。五、K562MDR細胞內ADM的蓄積和排出的檢測:用流式細胞儀檢測K562及K562MDR細胞內ADM的蓄積和排出。六、ITV對P一Bp作用的檢測:用，H一Azidopine光親和性標記來檢測JTV對P一9P的作用。七、統(tǒng)計學處理:所得數(shù)據(jù)用均值加減標準差表示，顯著性檢驗采用t檢驗P0

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