嗜水氣單胞菌感染對(duì)團(tuán)頭魴鐵代謝影響的初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、鐵是機(jī)體必要的微量元素之一,也是多數(shù)病原菌不可或缺的營(yíng)養(yǎng)元素,兩者對(duì)鐵的共同需求形成了競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)主要研究需鐵病原菌—嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)感染引起的團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)肝、脾、腎、腸等組織的病理變化和對(duì)鐵代謝及其調(diào)節(jié)的影響。實(shí)驗(yàn)選取480尾健康的團(tuán)頭魴幼魚(yú),規(guī)格在30±5g,隨機(jī)分成兩組進(jìn)行試驗(yàn)。采用腹腔注射法,實(shí)驗(yàn)組注射1×106 cfu/mL菌懸液0.1m

2、L,對(duì)照組注射體積等量的0.65%無(wú)菌生理鹽水,在感染后0h、4h、12h、24h、72h、120h等時(shí)間點(diǎn)采集組織樣本,檢測(cè)團(tuán)頭魴肝、脾、腎、腸等組織的病理變化、機(jī)體鐵代謝水平以及與鐵代謝調(diào)節(jié)相關(guān)的基因表達(dá)的變化趨勢(shì)。研究結(jié)果如下:
  1.嗜水氣單胞菌感染后團(tuán)頭魴各組織的病理反應(yīng)在急性感染后4-12h,團(tuán)頭魴的肝、脾、腎、腸等組織開(kāi)始發(fā)生病變反應(yīng):肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡,細(xì)胞腫大,細(xì)胞核腫脹且移至細(xì)胞邊緣,核仁不可見(jiàn),胞漿內(nèi)有顆?;?/p>

3、物質(zhì)。肝細(xì)胞索結(jié)構(gòu)模糊,排列紊亂,細(xì)胞界限不清晰,竇狀隙內(nèi)有淤血現(xiàn)象,靜脈有溢血,肝細(xì)胞間滲有大量的血細(xì)胞。相對(duì)于健康的脾臟,病變的脾臟細(xì)胞腫大,組織間伴有出血現(xiàn)象,組織細(xì)胞排列松散不整齊,結(jié)構(gòu)模糊,組織中出現(xiàn)空隙。腎臟組織中腎小管的病變程度不一,部分腎小管上皮細(xì)胞明顯腫大且結(jié)構(gòu)相對(duì)紊亂,部分細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)有空泡,有解體趨勢(shì)。腎小球毛細(xì)血管擴(kuò)張,嚴(yán)重的腎小球結(jié)構(gòu)模糊、松散,呈空泡狀,腎小囊內(nèi)存在大量空隙。腸道的粘膜下層和漿膜層增厚,結(jié)構(gòu)稀

4、疏水腫,出現(xiàn)大量紅細(xì)胞。肌纖維排列紊亂,有少量空泡散布其中,部分腸絨毛壞損,粘膜層上皮細(xì)胞脫落,杯狀細(xì)胞數(shù)量增多。
  2.嗜水氣單胞菌感染對(duì)團(tuán)頭魴鐵代謝的影響實(shí)驗(yàn)組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)團(tuán)頭魴的血清鐵濃度相對(duì)于對(duì)照組均有不同程度的降低,呈現(xiàn)先降低后上升的趨勢(shì),并在攻毒后12h、24h達(dá)到了顯著性水平(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)組團(tuán)頭魴的血清總鐵結(jié)合力相對(duì)于對(duì)照組有不同程度的增加,但均未達(dá)到顯著性水平。鐵染色結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組肝臟鐵分布密度明顯高于對(duì)

5、照組;肝臟鐵定量結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組肝臟中鐵含量高于對(duì)照組,但沒(méi)有達(dá)到顯著性水平(P>0.05)。
  3.嗜水氣單胞菌感染對(duì)團(tuán)頭魴鐵代謝調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達(dá)水平的影響肝臟hepc基因在感染后各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)量相對(duì)于對(duì)照有明顯上調(diào),均達(dá)到了顯著性水平(P<0.05),在感染后4h和12h達(dá)到了極顯著性水平(P<0.01)。il-6基因在肝臟中的表達(dá)量增加,在4h和12h達(dá)到了顯著性水平(P<0.05),在感染后24 h達(dá)到了極顯著性水平(P<

6、0.01)。JAK-STAT信號(hào)通路中的jak3基因的表達(dá)量上升,在4h、12h達(dá)到了顯著性水平(P<0.05),隨后有所下降;stat3基因表達(dá)量增加,并在4h、12h和24h達(dá)到了極顯著性水平(P<0.01),在72h達(dá)到了顯著性水平(P<0.05)。BMP-SMAD信號(hào)通路的相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)量均有所上調(diào):bmp6基因表達(dá)量在4h和12h達(dá)到了極顯著性水平(P<0.01),24 h達(dá)到了顯著性水平(P<0.05),隨后下降至近感染

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