1、本文采用雙光子激發(fā)熒光(TPE fluorescence)技術(shù)，研究光敏劑5-ALA在濾泡性淋巴瘤白血病(DHL)細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化并積聚成光敏性物質(zhì)PpⅨ的動力學(xué)過程，基于雙標(biāo)的熒光標(biāo)記方法研究5-ALA代謝的PpⅨ在DHL細(xì)胞的分布，并以輸出波長為630nm的半導(dǎo)體激光器為光源，對5-ALA體外殺傷DHL細(xì)胞優(yōu)化參數(shù)進(jìn)行了初步實驗研究。 首先，簡要介紹了白血病的相關(guān)基礎(chǔ)知識以及目前治療白血病常用的方法，介紹了體外凈化白血病細(xì)胞的方法

2、和基于光動力應(yīng)用體外凈化白血病細(xì)胞的研究進(jìn)展；同時介紹了激光掃描共聚焦顯微鏡的原理，雙光子熒光技術(shù)的原理和優(yōu)點，及其在細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用。 其次，嘗試使用雙光子激發(fā)熒光光譜的方法，在Lambda模式下，利用META探測系統(tǒng)獲得DHL細(xì)胞在不同濃度的5-ALA及不同孵育時間下，代謝并積聚的PpⅨ的特征熒光強度，從而間接獲得5-ALA在DHL細(xì)胞中的代謝動力學(xué)過程。同時結(jié)合內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、溶酶體等細(xì)胞器熒光探針的使用，采用雙光子激發(fā)

3、，雙通道接收方法獲得細(xì)胞器探針和PpⅨ熒光圖像，并對獲得的熒光融合圖像進(jìn)行處理，通過計算細(xì)胞器熒光圖像與PpⅨ熒光圖像的相關(guān)系數(shù)R，進(jìn)而獲得PpⅨ在DHL細(xì)胞中不同細(xì)胞器的定位分布情況。 進(jìn)而，利用630nm半導(dǎo)體激光對白血病DHL細(xì)胞進(jìn)行體外殺傷的初步實驗研究，獲得不同光輻照功率密度和光劑量組下ALA-PDT對DHL細(xì)胞殺傷率的優(yōu)化參數(shù)。 最后，總結(jié)了本論文的主要研究內(nèi)容和結(jié)果，介紹了論文的主要創(chuàng)新之處，并提出今后擬開