1、肝癌在所有癌癥的發(fā)病率中占到了5％,其死亡率在世界排名前三。肝癌病人最不良的結果是肝癌的高轉移性導致其失去手術切除腫瘤的機會。腫瘤轉移是一個復雜的過程并可最終導致死亡。成纖維細胞的轉化是腫瘤細胞成功遷移的第一步。許多研究已經證實上皮-間質(EMT)細胞轉化在腫瘤的轉化及進程中發(fā)揮重要的作用。調控這一轉化過程的其中一個信號通路是Wnt信號通路。激浯Wnt信號能促進增殖,上皮形態(tài)缺失和脫分化。Wnt信號在多種腫瘤,如乳腺癌、胃癌、宮頸癌等癌

2、細胞中調節(jié)EMT的發(fā)生和發(fā)展。目前在肝癌細胞中關于Wnt與EMT的相關研究較少,并且還沒有明確結論,下游調節(jié)的分子機制也不清楚。Wnt信號在肝癌EMT的發(fā)生中,要么不起作用,要么也有一定的調節(jié)方式。許多研究已證實肝細胞核因子4-alpha(HNF4a)在胚胎發(fā)育及維持成人肝細胞分化表型中發(fā)揮重要功能。下調該基因表達與肝癌發(fā)生及細胞增殖、上皮形態(tài)缺失、脫分化相關,這正與Wnt信號通路異常激活的功能一致。而我們的研究主要集中在Wnt信號誘導

3、的肝細胞癌EMT進程是否調控HNF4a的表達。
　　 本課題從分子、細胞水平上系統(tǒng)地研究了Wnt信號通路誘導的肝細胞癌EMT進程負調控HNF4a的分子機理。首先,我們在肝癌細胞系中轉染缺失β-catenin結合位點的dnTCF驗證Wnt信號與肝癌細胞EMT形態(tài)的直接調控關系,即Wnt信號減弱會導致肝癌細胞EMT表型改變,肝癌細胞由紡錘狀的間充質形態(tài)向上皮質形態(tài)轉化。接著,dnTCF導致的Wnt信號缺失能改變EMT標記基因E-ca

4、dherin與Vimentin的水平,并下調Wnt靶基因Axin2、Snail及Slug的水平,說明Wnt信號與肝癌細胞EMT的正相關性。再次,我們證實了在肝癌細胞系中Wnt信號誘導的EMT可負調控HNF4a;激活Wnt信號直接導致細胞內HNF4a水平的急劇下降。并通過進一步的研究發(fā)現(xiàn)Wnt信號主要是通過下游靶基因Snail和Slug與HNF4a啟動子上的E-BOX序列結合而負調控HNF4a。最后,我們的研究還發(fā)現(xiàn)Wnt信號通路與HNF