1、目的: 觀察趨化因子MCP-1、FKN及細(xì)胞因子TNF-α在大鼠缺血再灌注后缺血區(qū)腦組織中的表達(dá)，探討三者在再灌注炎癥中的變化規(guī)律及意義。
　　 方法: 102只體重約250-300g健康成年雄性SD大鼠，隨機(jī)分為9組:正常組(n=6)、假手術(shù)組(n=12)、缺血2h再灌注3h組即I2h/R3h(n=12)、I2h/R6h組(n=12)、I2h/R12h組(n=12)、I2h/R24h組(n=12)、12h/R48h組(n=12

2、)、I2h/R72h組(n=12)、I2h/R7d組(n=12)。采用Longa線拴法[1]制備大腦中動(dòng)脈栓塞模型(MCAO)，術(shù)后評(píng)估大鼠神經(jīng)功能情況。正常組、假手術(shù)組、I/R各亞組每組各6只大鼠，采用尼氏體染色觀察腦組織病理學(xué)變化;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組FKN、MCP-1、TNF-α在缺血區(qū)腦組織免疫陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)變化。假手術(shù)組、I/R各亞組各6只大鼠，應(yīng)用Western blot方法檢測(cè)缺血再灌注后各時(shí)間點(diǎn)FKN蛋白的表達(dá)水平。<

3、br>　　 結(jié)果:
　　 1.尼氏體染色示:正常組及假手術(shù)組大鼠缺血區(qū)腦組織內(nèi)尼氏體大，數(shù)量多;與正常組及假手術(shù)組相比，再灌注后3h組、6h組尼氏體含量逐漸減少(P＞0.05)，12h組、24h組、48h組、72h組、7d組尼氏體含量進(jìn)一步減少(P＜0.05)。
　　 2.免疫組化結(jié)果示:TNF-α在正常組及假手術(shù)組少量表達(dá)，兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); TNF-α在再灌注后早期（3h組）即出現(xiàn)表達(dá)上調(diào)(P

4、＜0.05)，24h組表達(dá)達(dá)高峰(P＜0.05)，隨后逐漸下降，7d組TNF-α陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)數(shù)回歸基線水平(P＞0.05)。趨化因子FKN在正常組和假手術(shù)組均有一定數(shù)量的表達(dá)，兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);再灌注后3h組表達(dá)上調(diào)(P＜0.05)，24h組達(dá)高峰(P＜0.05)，然后逐漸下降，7d組陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)數(shù)差異與正常組及假手術(shù)組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。趨化因子MCP-1在正常組及假手術(shù)組極少量表達(dá)，再灌注后其表達(dá)

5、上調(diào)稍延遲，于6h組出現(xiàn)升高(P＜0.05)，48h組達(dá)高峰(P＜0.05)，然后逐漸下降，7d組表達(dá)仍較高(P＜0.05)。
　　 3.Western Blot檢測(cè)示:FKN在假手術(shù)組有一定水平的表達(dá)，再灌注后3h組表達(dá)即有上調(diào)(P＜0.05)，24h組表達(dá)水平最高(P＜0.05)，48h組仍有較高的表達(dá)水平(P＜0.05)，7d組回歸基線水平。
　　 結(jié)論:
　　 1.大鼠腦缺血再灌注后損傷區(qū)早期即出現(xiàn)TNF