1、絲黑穗病是玉米生產(chǎn)中最嚴(yán)重的病害之一，在世界范圍內(nèi)發(fā)生，造成玉米產(chǎn)量極大損失。玉米對絲黑穗病的抗性呈數(shù)量性狀遺傳特點(diǎn)，受多個(gè)位點(diǎn)控制。本研究旨在發(fā)現(xiàn)玉米抗絲黑穗病的主效QTL(quantitativetraitloci)，在此基礎(chǔ)上發(fā)展分子標(biāo)記，飽和主效QTL區(qū)域，為抗病主效QTL的克隆奠定基礎(chǔ)。本研究的主要結(jié)果分以下4個(gè)方面： 1.利用94個(gè)來自于‘吉1037’(高抗，供體親本)和‘黃早四’(高感，輪回親本)BC1∶2家系的材

2、料來定位抗病QTL。在播種時(shí)將上年病源菌與細(xì)土混合覆蓋種子進(jìn)行人工接種，在抽穗后對每個(gè)家系進(jìn)行絲黑穗病抗性鑒定。同時(shí)，從700對SSR引物中篩選出357對在兩親本間表現(xiàn)多態(tài)性的引物，從中選定120對擴(kuò)增條帶清晰的SSR分子標(biāo)記用于各個(gè)家系的基因型測定。采用復(fù)合區(qū)間作圖法檢測到兩個(gè)抗性QTL，分別位于第2和第5染色體上。其中第2染色體上的主效QTL(qRHS1)位于分子標(biāo)記umc1736和umc2184之間(bin2.09，遺傳距離為13

3、.5cM)，LOD值達(dá)到11.8，可以解釋表型變異達(dá)到36％。第5染色體上的QTL(qRHS2)位于umc2115和bnlg1879區(qū)間內(nèi)(bin5.02，遺傳距離為14.2cM)，LOD值達(dá)到3.1，可以解釋的表型變異為9％。 2.查找qRHS1區(qū)域(bin2.09)已定位的IDP、EST和RGA等序列，在此基礎(chǔ)上通過設(shè)計(jì)引物、PCR擴(kuò)增、測序等獲得親本‘吉1037’和‘黃早四’對應(yīng)的序列，比較序列差異后發(fā)展新的分子標(biāo)記。在發(fā)

4、展的6個(gè)分子標(biāo)記中，經(jīng)過定位，發(fā)現(xiàn)有3個(gè)位于主效qRHS1內(nèi)，包括一個(gè)CAPS標(biāo)記(C1，來自于IDP25082)、一個(gè)STS標(biāo)記(C3，來自于IDP1944)和一個(gè)SNP標(biāo)記(C4，來自于IDP661)；另外，分子標(biāo)記C5(來自于bin2.09的RGA序列)也定位在主效QTL附近，位于bnlg1520上游；最后二個(gè)分子標(biāo)記C2(來自于AZM4140313的標(biāo)記)和C6(來自于BG840810的標(biāo)記)定位不在bin2.09區(qū)域，C2定位

5、于第1染色體的umc1184和umc2189之間；C6定位于第1染色體的分子標(biāo)記umc1403和umc1243之間。 3.在314個(gè)BC1植株中發(fā)現(xiàn)12個(gè)在qRHS1區(qū)域內(nèi)發(fā)生交換的單株。運(yùn)用這12個(gè)BC1交換株和主效qRHS1區(qū)段內(nèi)的SSR及新發(fā)展的分子標(biāo)記，將此抗性基因限定在C4和umc1736之間，遺傳距離為9.2cM。 4.在1750個(gè)BC2植株中，用qRHS1置信區(qū)間兩側(cè)的SSR標(biāo)記umc2184和umc173